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微生物的分离和培养高三生物一轮复习
专题二 微生物的分离和培养 【考纲考点】 近五年江苏高考关于本章的考察情况: 命题趋势 由上述的分析可以看出这部分知识在每年的生物高考题都有出现,且主要集中在对DNA粗提取与鉴定试验的考察。微生物的知识由于在13年考试说明中新添加,其考察的知识点主要以微生物培养和分离的方法知识为主。因此复习备考的过程中,要注意加强这部分相关知识的学习。 第一讲 微生物的分离和培养 学习目标: 1.简述培养基的用途和分类 2.说出培养基的基本成分 3.简述无菌技术的概念含义 4.尝试制备牛肉膏蛋白胨培养基 5.尝试通过平板划线法纯化一种微生物 (1)固体培养基、液体培养基和半固体培养基 ①固体培养基:(观察菌落和分离提纯微生物) 在一般培养温度下呈固体状态的培养基。 一类是用天然的固体状物质制成的,如用马铃薯块、麸皮、米糠、豆饼粉、花生饼粉制成的培养基,酒精厂、酿造厂等常用这种培养基; 另一类是在液体中添加凝固剂而制成的,如实验室中常用的琼脂固体斜面和固体平板培养基。这种培养基广泛用于微生物的分离、鉴定、保藏、计数及菌落特征的观察等。 ②液体培养基或培养液或发酵液:(工业大规模培养 ) 呈液体状态的培养基。液体培养基因营养物质分布均匀,与菌体表面接触充分,还能大量溶解微生物的代谢产物等优点,广泛用于微生物的生理、代谢研究以及大规模的工业化生产中。 ③半固体培养基:(观察微生物的运动)加入少量的凝固剂(如0.2%~0.5%的琼脂)而制成的培养基。这种培养基常用于观察细菌的运动、厌氧菌的分离和菌种鉴定等。 (2)天然培养基和合成培养基 ①天然培养基:(工业生产降低成本) 主要取自动物体液或从动物组织分离提取。其优点是营养成分丰富,培养效果良好,缺点是成分复杂,来源受限。天然培养基/液的种类很多,包括生物性液体(如血清);组织浸液(如胚胎浸液);凝固剂(如血浆)等。 ②合成培养基:(菌种的分类,鉴定,营养、代谢 ,遗传、鉴定和生物测定等定量要求较高的研究)是通过顺序加入准确称量的高纯度化学试剂与蒸馏水配制而成的。其所含的成分(包括微量元素在内)以及他们的量都是确切可知的。 ②鉴别培养基: 配制特点:在培养基中加入某种指示剂或化学药品,以鉴别不同种类的微生物。(即只能鉴别出你此种微生物是不是你所需要的微生物,而不能抑制其余种类的微生物生长 ) 例如:伊红美蓝培养基 (1)用途:伊红美篮培养基一般用于检测饮用水和乳制品中是否存在大肠杆菌等细菌。 (2)原理:伊红为酸性染料,美篮为碱性染料。当大肠杆菌分解乳糖产酸时细菌带正电荷被染成红色,再与美篮结合形成紫黑色菌落,并带有金属光泽。 例1、要将土壤中的自生固氮菌(如原褐固氮菌)与其它细菌分离出来,应将它们接种到(?? ) A.加入指示剂的鉴别培养基??????? B.含有蛋白胨的固体培养基 C.没有有机氮的选择培养基??????? D.营养要素全面的液体培养基 例2、某同学在做微生物实验时,不小心把原褐固氮菌和酵母菌混在一起,为了得到纯度较高的酵母菌,配制好的培养基中应再加入?(???? )A.高浓度的食盐????? B.硝酸盐 C.伊红美蓝溶液????? D.青霉素 例3、在培养金黄色葡萄球菌时污染了青霉菌,青霉菌菌落周围区域内金黄色葡萄球菌不能生存。下列相关叙述错误的是?? (???? ) A.青霉菌和金黄色葡萄球菌之间的关系为竞争 B.要保留金黄色葡萄球菌,可用含高浓度食盐的培养基进行选择 C.若金黄色葡萄球菌仍然生存,可能发生了抗青霉素的基因突变 D.补充适合金黄色葡萄球菌的营养能保存该菌 碳源、氮源、生长因子的比较 (2013.18) 某研究小组从有机废水中分离微生物用于废水处理。下列叙述正确的是( ) A.培养基分装到培养皿后进行灭菌 B.转换划线角度后需灼烧接种环再进行划线 C.接种后的培养皿须放在光照培养箱中培养 D.培养过程中每隔一周观察一次 2.菌种培养: 3.实验结果观察 将接种后的培养基和一个未接种的培养基 放入37℃恒温箱中培养12h~24h后, 观察并记录 四.菌种的保藏: 1.临时保藏: 试管固体斜面培养基上 4℃ 2.长期保存: 菌种易被污染、变异 甘油管藏 1ml甘油+1ml菌液 -20℃ 【真题练习】 * B DNA的粗提取与鉴定 A 微生物的分离和培养 A 微生物的分离和培养 等级要求 考试说明 4DNA粗提取与鉴定,18微生物的培养方法 13 18考察DNA粗提取与鉴定 12 19考察DNA的粗提取与鉴定 11 32考察DNA粗提取的相关探究活动的实验设计 10 21和23考察DNA的鉴定和提取 09 微生物的类群 原生生物 原核生物 真菌 病毒 如酵母菌 单细胞的动植物 如草履虫、单细胞藻类等 微生物包含了除植物界和动物界以外的所有生
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