微生物的实验室培养-(2016上课).ppt

倒平板 约50℃ 1.培养基灭菌后，需要冷却到50 ℃左右时，才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度？ 答：可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可以进行倒平板了。 2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？ 答：通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。 3.平板冷凝后，为什么要将平板倒置？ 4.在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？ 答：平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。 答：空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生，因此最好不要用这个平板培养微生物。 2、纯化大肠杆菌 接种方法有： 平板划线法 稀释涂布平板法 微生物的接种技术 平板划线法： 通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步 到培养基表面。 其操作步骤是： ①将 在酒精灯火焰上灼烧直至烧红。 ②在酒精灯火焰旁 接种环，并打开大肠杆菌的菌种试管的棉塞。 ③将菌种试管口通过火焰达到消灭试管口 的目的。 ④将冷却的接种环伸入到菌液中取出一环 。 ⑤将菌种试管口再次通过火焰后塞上棉塞。 ⑥将皿盖打开一条缝隙，把接种环伸入平板内划 3～5条 线，盖上皿盖，不要划破培养基。 ⑦灼烧接种环，冷却后从第一区划线 开始向第二区域内划线。重复上述过程，完成三、四、五区域内划线。注意不要将第五区的划线与第 区划线相连。 ⑧将平板 放在培养箱中培养。 平板划线法： 通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面。 其操作步骤是： ①将接种环在酒精灯火焰上灼烧直至烧红。 ②在酒精灯火焰旁冷却接种环，并打开大肠杆菌的菌种试管的棉塞。 ③将菌种试管口通过火焰达到消灭试管口杂菌的目的。 ④将冷却的接种环伸入到菌液中取出一环菌种。 ⑤将菌种试管口再次通过火焰后塞上棉塞。 ⑥将皿盖打开一条缝隙，把接种环伸入平板内划 3～5条平行线，盖上皿盖，不要划破培养基。 ⑦灼烧接种环，冷却后从第一区划线末端开始向第二区域内划线。重复上述过程，完成三、四、五区域内划线。注意不要将第五区的划线与第一区划线相连。 ⑧将平板倒置放在培养箱中培养。 接种、划线 灼烧接种环→ 取菌液→ 划线分离→ 烧至暗红 接种、划线 灼烧接种环→ 取菌液→ 划线分离→ 菌液膜 到目前为止， 几十项Nobel生理学和医学奖，化学奖 都与微生物学有关 微生物的类群 原生生物： 原核生物: 真菌: 病毒: 如酵母菌 单细胞的动植物 如草履虫、单细胞藻类等 无细胞结构 真核细胞 细菌、蓝藻 原核细胞 课题1 微生物的实验室培养 1.提供营养和条件 2.防止污染 一、基础知识： （一）培养基 培养基（培养液）是由人工方法配制而成的，专供 生长繁殖使用的混合营养液。 培养基可分为固体培养基和液体培养基。琼脂作 2.不管哪种培养基， 一般都含有 、 源、和 源、 等营养物质，另外还需要满足微生物生长对 、 营养物质,例如:生长因子(即细菌生长必需，而自身不能合成的化合物,如维生素、某些氨基酸、嘌呤、嘧啶) 以及、 等的要求。 1.培养基的类型 微生物 水 碳 氮 无机盐 pH 特殊 氧气 凝固剂 3.牛肉膏和蛋白胨主要为微生物提供 、 、 和 等营养物质。 4.培养乳酸杆菌时需要添加 ，培养霉菌时需要将培养基pH调节为 ，培养细菌时需要将pH调节为 。 3.牛肉膏和蛋白胨主要为微生物提供 碳源 、 氮源 和 维生素 等营养物质。 4.培养乳酸杆菌时需要添加 维生素 ，培养霉菌时需要将培养基pH调节为 酸性 ，培养细菌时需要将pH调节为 中性或微碱性 一.培养基： 微生物生存的环境和营养物质 1.基本成分： 思考：微生物“吃”什么？ 碳源、氮源、水、无机盐 ⑴碳源 无机碳源： 有机碳源： CO2、CO32-、HCO3- 牛肉膏、蛋白胨等 自养微生物 异养微生物 ⑵氮源 无机氮源： 有机氮源： NH4＋、NO3-（为硝化细菌提