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碱性磷酸酶的动力学分析.pptx

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碱性磷酸酶的动力学分析

实验四 碱性磷酸酶的动力学分析;酶促反应动力学:研究酶促反应速度及其影响因素,并加以定量的阐述。 影响因素:酶浓度、底物浓度、pH、 温度、抑制剂、激活剂等。 在研究某种因素对酶促反应速度的影响时, 其余各因素均需保持恒定。;一、实验目的;二、实验原理;1.温度对酶促反应速度的影响;2.pH对酶促反应速度的影响;3.底物浓度对酶促反应速度的影响;[S]与V的关系:米-曼氏方程;Km与Vmax的意义;Km和Vmax值的测定;4.抑制剂对酶促反应速度的影响;竞争性抑制曲线图;非竞争性抑制曲线图;反竞争性抑制曲线图;竞争性抑制作用;竞争性抑制作用;竞争性抑制作用特点:; 5.酶活性的测定;磷酸苯二钠法测定ALP的活性;C6H5;Lambert-Beer定律:; 100mL酶液在37℃下保温15min产生1mg酚为一个酶活性单位 。 从标准曲线查出释放出的酚量(μg)则可计算出酶活性;三、试剂和仪器;四、操作步骤;五、结果与计算;六、结果绘图;[作图];七、注意事项

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