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电镜技术 主要内容 1.回顾光学显微镜 2.电子显微镜的产生、发展 3.电子显微镜的分类及特点 1610年前后,意大利的伽利略和德国的J.开普勒在研究望远镜的同时,改变物镜和目镜之间的距离,得出合理的显微镜光路结构,当时的光学工匠遂纷纷从事显微镜的制造、推广和改进。 17世纪中叶,英国的罗伯特.胡克(用自己制造的显微镜观察软木切片,‘细胞’)和荷兰的安东尼·冯· 列文胡克(制造了只有一片凸透镜的显微镜,放大了300倍)都对显微镜的发展作出了卓越的贡献。 光学透镜成像原理 三维立体显微镜 电子显微镜的产生与发展 2.电子显微镜的产生与发展(请自己查阅资料) 由于光源本质的限制,光学显微镜的分辨率只能达到0.2μm 分辨率公式: δ=0.61λ/nsinα(abbe公式) λ为所用光波的波长;n为物体所在空间的折射率,物体在空气中时N=1;α为孔径角,即从物点发出能进入物镜成像的光线锥的锥顶角的半角; nsinα 称为数值孔径。 数值孔径:显微物镜的一个重要性能指标,通常与放大倍率一起标注在物镜镜筒外壳上,例如40×0.65表示物镜的放大倍率为40倍,数值孔径为0.65。 要提高分辨率,即减小δ值,可采取以下措施(1) 降低波长λ值,使用短波长光源。(2) 增大介质n值以提高数值孔径值。(3) 增大孔径角α值以提高数值孔径。 1928年,柏林工科大学的克偌尔和茹斯卡奠定了电镜的理论基础。 1933年,茹斯卡制造的第一台电子光学装置,可放大12000倍。 1938年,茹斯卡制造的第一台透射电子显微镜,分辨率达100埃。 1939年,德国西门子公司按该样机生产了世界第一批商品电镜40台,并在战后运往其他国家,使人类的形态学研究跨入了超微结构新领域。 1939年,茹斯卡通过电镜技术发现了烟草病毒,解决了30年前的悬案,引起了世界震动。加速了电镜技术的发展。继而在植物中发现了彩虹病毒、风轮病毒、家蚕病毒等;在人体中发现了流感病毒、天花病毒、肝炎病毒、麻风杆菌等,同时也找出了一些污染源和毁灭性的瘟疫流行渠道。 1953年,日本发现了桑树维管束中的微生物。 80年代,电镜技术在自然学科的许多领域中得到了广泛应用,并形成了一门交差型的新型学科。科学家利用电镜技术发现了多种病毒,污染水源中的微生物,有毒物质,纳米材料等,其中纳米材料使纳米技术崛起并迅速发展。 1982年,诺贝尔化学奖授予卓越的电镜应用者——英国的分子生物学家克卢格(A.Klug) 1986年,瑞典皇家科学院将诺贝尔物理学奖授予电子显微镜的发明者——德国科学家恩斯特.茹斯卡(ErnstRuska,1906-1988);授予扫描隧道显微镜的设计者——德国物理学家宾尼希(Gerd Binnig,1947-)和瑞士物理学家罗雷尔(Heinrich Rohrer,1933-)。 1958年,我国成功地研制了第一台透射电子显微镜分辨本领为3nm,1979年分辨本领达到0.3nm。 3.电镜的种类与特点 主要两大类: 透射电子显微镜(TEM) 扫描电子显微镜(SEM) 一、透射电子显微镜(TEM) 电子束透过样品(透射电子)直接放大成像。 特点: 分辨率高 ,视场小。 制样技术: 超薄切片技术、负染技术、投影技术和复型技术等。 应用范围: 广泛应用于样品局部切片的超微结构,纳米材料等。 二、扫描电子显微镜(SEM) 电子束以扫描形式轰击在样品上,产生二次电子等信息,而后再将二次电子等信息收集起来放大成像。 特点: 分辨率高,图像立体感强。 制样技术: 临界点干燥技术、冷冻干燥技术、蚀刻技术、组织导电技术和切片腐蚀技术等。 应用范围: 样品表面及其断面立体形貌的观察。 兼有扫描电镜和透射电镜双重功能,称为扫描透射电镜(STEM) 。 特点: 可观察样品的表面和内部结构形态。 制样技术: 切片厚度可以相应增加,约为1500 ?左右。 加速电压在500KV以上的透射电镜又称超高压电镜。 特点: 分辨率高,加速电压高,穿透力强,对样品损伤小。 制样技术: 切片较厚,含水,都可满足电镜观察要求。 应用范围: 可广泛应用于材料科学、生物学、医学等。 扫描
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