革兰阴性需氧和兼性厌氧杆菌检验.ppt

三、微生物学检验 1、标本采集 按疾病和检查目的分别采取不同的临床标本，医院环境检测可从空气、水、物体表面等处采样。 2、检验方法 1）直接涂片染色镜检 2）分离培养 3）鉴定 4）鉴别 二、产碱杆菌属 产碱杆菌属典型的菌种是粪产碱杆菌。 一、生物学性状 1、形态与染色 革兰阴性杆菌，常呈单、双或链状排列。具有周鞭毛，无芽孢，多数菌株无荚膜。 2、培养特性 专性需氧，营养要求不高。在普通琼脂平板上生长良好。麦康凯和SS平板上，形成不发酵乳糖的无色透明菌落。在蛋白胨的肉汤中产氨，可使培养基pH增至8.6以上 二、临床意义 临床最常见的是粪产碱杆菌，大部分感染是条件致病 三、微生物学检验 三、不动杆菌属 不动杆菌属归属于奈瑟菌科，临床上分离出来的绝大多数为鲍曼不动杆菌。 一、生物学性状 1、形态与染色 革兰阴性球杆菌，常呈双排列。无芽孢，无鞭毛，有荚膜。 2、培养特性 专性需氧，营养要求不高。在普通培养基和麦康凯培养基上。 3、生化反应 触酶阳性，O/F为氧化型，氧化酶阴性，动力，硝酸盐还原试验阴性（三阴） 二、临床意义 本菌的分离率是仅次于铜绿假单胞菌而位居第二位的非发酵菌病 三、微生物学检验 其他革兰阴性苛养菌 苛养菌是指对生长环境、营养要求较苛刻的细菌，在普通环境中不能或难以生长。体外培养需添加特殊因子或其他营养成分。常见苛养菌有嗜血杆菌属、鲍特菌属、军团菌属、布鲁菌属。 一、流感嗜血杆菌 本属细菌因人工培养时必须加含X、V因子的血液而得名。 代表菌为流感嗜血杆菌。 一、生物学性状 流感嗜血杆菌简称流感杆菌，革兰阴性菌短小杆菌，无鞭毛、无芽孢、黏液型菌株有荚膜。 需氧或兼性厌氧，生长时需要X因子、V因子或二者之一。在巧克力平板上，形成圆形、光滑、透明似露珠的小菌落。 当流感嗜血杆菌与金黄色葡萄球菌一起培养时，可见到金黄色葡萄球菌周围的流感嗜血杆菌菌落较大，而远离葡萄球菌的流感嗜血杆菌菌落较小，这种现象称为卫星现象。这是因为葡萄球菌能合成Ⅴ因子释放于培养基中，从而促进流感嗜血杆菌的生长。这一现象有助于对流感嗜血杆菌的鉴定。 二、临床意义 本菌主要寄生在人的鼻咽眼及阴道粘膜中，人是唯一的传染源和带菌者。 三、微生物学检查 1、标本采集 2、检验方法 3、鉴定 二、鲍特菌属 本属细菌以百日咳鲍特菌为代表菌。 （一）生物学性状 革兰阴性球杆菌，无鞭毛、无芽孢，光滑型菌株有荚膜。 专性需氧，营养要求很高，常用鲍-金培养基进行分离培养。 新分离的菌株为光滑型，称I相菌，具有菌体和表面抗原。 （二）临床意义 百日咳外毒素是百日咳的主要毒力因子。 三、军团菌属 本属细菌主要致病菌为嗜肺军团菌。 （一）生物学性状 常用镀银染色和吉姆萨染色法 （二）临床意义 致病物质主要为菌毛、毒素和多种酶类 嗜肺军团菌为胞内寄生菌，细胞免疫在抗感染中其主要作用。 四、布鲁菌属 本属细菌主要致病物质为内毒素、荚膜、侵袭性的酶。 主要引起布鲁菌病。以细胞免疫为主。 五、弯曲菌属 对人类致病的主要为空肠弯曲菌和胎儿弯曲菌。前者是人类腹泻最常见的病原菌之一，后者在免疫功能低下时可引起败血症、脑膜炎。 一、生物学特性 （1） 为革兰氏阴性、细长、螺旋形或海鸥展翅状、S形的弯曲杆菌。陈旧培养物可呈球形或长丝状。一端或两端具有单鞭毛，运动活泼，有时呈螺旋状运动。一端单鞭毛多见于胎儿亚种，两端单鞭毛多见于空肠弯曲菌，无芽孢、无荚膜。 （2）微需氧菌，初次分离时需在含5%O2、85%N2、10%CO2气体环境中生长，传代培养时能在10%CO2环境中生长。 （3）营养要求高，在普通培养基上不能生长，需加血液、血清。 （4）该菌属生化反应不活泼。不分解糖类、不液化明胶、不分解尿素，V-P和甲基红试验均阴性。氧化酶均为阳性，大多数弯曲菌还能还原硝酸盐，触酶试验为阳性，空肠弯曲菌马尿酸水解试验阳性。 （5）耐寒，在4℃冰箱或水中可存活4周。 二、临床意义 主要通过食物和水传播，引起人类肠道感染和各种肠道外感染。该菌属中的空肠弯曲菌是引发散发性细菌性肠炎的最常见菌种之一，胎儿弯曲菌主要引起肠道外感染，其中胎儿亚种为主要的人类致病菌。 三、微生物学检验 六、螺杆菌属 ※对人类致病的主要为幽门螺杆菌（Hp） ※在胃黏膜层中呈鱼群样排列。 ※营养要求高，以布氏琼脂为基础培养基，需加用适量全血或胎牛血清作为补充物才能生长。 ※快速脲酶强阳性，是鉴定的重要依据。 ※ 幽门螺杆菌的传播途径主要是消化道，幽门螺杆局的感染可能与胃癌有关 Thank you ! * * * * * * * * *