苹果树腐烂病菌t-dna插入突变体的筛选及vmzfp3基因的功能分 析.pdfVIP

第40卷第2期 河北农业大学学报 V01．40NO．2 OFAGRICULTURALUNIVERSITYOFHEBEI JOURNAL 017 2017年3月 Mar．2 文章编号：1000—1573(2017)02—0073—06 苹果树腐烂病菌T—DNA插入突变体的筛选及 Vmzfp3基因的功能分析 李 婷1，吴玉星1，曹克强1，王树桐1，黄丽丽2，冯浩1 (1．河北农业大学植物保护学院，河北保定07100i； 2．西北农林科技大学植物保护学院／旱区作物逆境生物学国家重点实验室，陕西杨凌772lOO) 摘要：本研究采用接种离体枝条的方法，对150个苹果树腐烂病菌的T—DNA插入突变体库中的突变体进行了 致病性的筛选，经过多次试验得到了3个致病力明屁减弱的突变体，编号为X4379，X4368，X4468。基因组重测 以苹果树腐烂病菌的全基因组序列为依托，设计引物，构建敲除载体以及互补表达载体。运用PEG的方法转 因敲除转化子、互补转化子以及野生型苹果树腐烂病菌菌丝形态和致病力进行分析。与野生型菌株03—8相 比，Vmzfp3的敲除转化子的菌丝生长速率明显减慢，致病力也明显下降，其互补转化子使得这些功能缺陷均 得以恢复。Vmtme42的敲除转化子无明显区别。由此证明基因Vmzfp3对病菌的菌丝生长，病菌的致病力具 有调控作用。 关键词：苹果树腐烂病；锌指蛋白；基因敲除；致病力 中图分类号：$436．611．11 文献标志码：A ofValsamaliT—DNAinsertedmutants Screening and function of gene analysisVmzfp3 LI Ha01 Li-li2，FENG Tin91，WUYu．xin91，CAOKe—qiang，WANGShu-ton91，HUANG ofPlant of 071001，China； (1．College Protection，AgriculturalUniversityHebei，Baoding ofPlantProtection，NothestA＆F of 2．College University／StateKeyLaborcotory Stress forArid 72 100，China) Crop Biology Areas，Yangling Abstract：ThisresearchidentifiedthreeT—DNAmutants(X4379，X4368andX4468)whichdis— reduced fromtheATMTmutant played libraryinoculatingappletwigs． pathogenicity by X4379waschosentod