4第三章消毒与灭菌1.PPT

第三章 消毒与灭菌 第一节 物理因素对微生物的影响 补充：为什么冷冻保存细菌时，温度必须迅速降低? 补充：反复冻融对微生物活力的影响 ①高压蒸汽灭菌时压力与温度的关系 10磅(磅/平方英寸），115 ℃ ， 15磅，121 ℃ ， 20磅，126 ℃ 。 ②高压蒸汽灭菌的适用范围 适用于培养基、生理盐水、某些缓冲液、针剂、玻璃器皿、金属器械、工作服等。 血清、血液、酶、氨基酸等，只能采用过滤除菌的方法。 糖类溶液或含糖的培养基可用10磅15~20min灭菌，若压力、温度过高则可使培养基颜色变深。 ③高压蒸汽灭菌时注意事项 排冷空气 灭菌前要检查灭菌器内水位是否正常。 灭菌物品不要互相挤压过紧，以保证蒸汽通畅，使所有物品的温度均匀上升。 不耐热的塑料等材料切勿高压灭菌。 补充：温度敏感诱变育种 高温除了杀菌作用之外，如果使细菌长期处于一定范围的高温条件下，则可诱发变异。例如巴斯德用长期高温条件(42.5～43℃)育成制造炭疽菌苗的菌株，在低温下也有成功的诱变育种报道。 热力灭菌法 二、光线对细菌的影响 可见光线的影响 ：肉眼可见的光线对细菌一般无多大影响。但长时间暴露于光线之中，则细菌的代谢与繁殖亦可受到影响。故培养细菌及保存菌种，均应置于阴暗之处。 日光是有效的天然杀菌因素。 如细菌在直射日光下照射半小时到数小时以上即可死亡，芽胞对日光照射的抵抗力比繁殖体大得多，往往需经20小时才能死亡。 阳光暴晒消毒 在实践中，日光对被污染的土壤、牧场、畜舍垫料及用具等的消毒均具有重要意义。 ⑴光感作用(Photosensitization) 将某些荧光染料如美蓝、伊红、汞溴红、沙黄等加入培养基中，能增强可见光线的杀菌作用，这种现象称为光感作用。 ⑵光复活作用(Photoreactivation) 细菌受致死量的紫外线照射后，3h以内若再用可见光照射，则部分细菌又能恢复其活力，这种现象称为光复活作用；波长为510nm的可见光对细菌的光复活作用最有效。 日光杀菌作用的原理 日光杀菌作用的主要因素是紫外线，紫外线波长为200～300nm，而以260～265nm杀菌力最强。 实验室使用的紫外灯，其波长通常为253.7nm。 紫外线的穿透力不强，仅限于照射物的表面。 紫外线杀菌原理 紫外线照射细菌时，能使同一股DNA上相邻的两个胸腺嘧啶通过共价键结合成二聚体，以致影响DNA正常碱基的配对，引起致死性突变而死亡。 还有人认为紫外线可使空气中的氧分子转变为臭氧，臭氧再释放出氧化能力强的原子氧而具有杀菌作用。 紫外线杀菌的使用范围 常用于实验室、无菌室、手术室等空气的消毒和近距离物体表面的消毒。 紫外线照射诱变育种 如果细菌吸收的紫外线剂量不足致死量，则引起蛋白或核酸的部分改变，使细胞发生突变。因此，紫外线照射也是一种有效的诱变方法。 五、其他物理影响因素 电离辐射 红外线 微波 超声波 滤过 第二节 化学因素对微生物的影响 一 消毒剂和防腐剂的概念 消毒剂：用于杀灭病原微生物的化学药物。 防腐剂：用于抑制细菌生长繁殖的化学药物。 化学治疗剂：用于消除宿主体内病原微生物或其他寄生虫的化学药物。 消毒剂与防腐剂之间并没有严格的界限 消毒剂在低浓度时呈现抑菌作用，而防腐剂在高浓度时也能杀菌。 消毒剂与化学治疗剂不同 消毒剂的作用无选择性，能杀死病原体，同时对畜体的组织细胞可能有损害，故只能外用或用于环境的消毒。 化学治疗剂的作用具有选择性 它能阻碍微生物代谢的某些环节，使其生命活动受到抑制或使其死亡，而对宿主细胞毒副作用甚小。 二 消毒剂的种类 （1）使菌体蛋白质变性或凝固，如酚类（高浓度）、醇类、重金属盐类（高浓度）、酸碱类、醛类； （2）损伤胞浆膜，如酚类（低浓度）、表面活性剂、醇类等脂溶剂； （3）干扰细菌的酶系统和代谢，例如某些氧化剂、重金属盐类（低浓度）； （4）改变核酸的功能，如染料、烷化剂。 2. 消毒剂的应用 主要用于体表、器械、排泄物和环境的消毒。 选择消毒剂的原则： 杀菌力和穿透力强、奏效快； 易溶于水，使用方便，价格低； 性质稳定，不易分解，便于保存； 对机体或环境无毒性或毒性较小，对消毒物品无腐蚀性，无残留，对环境无污染； 杀菌力不受或少受有机物存在的影响。 三 影响消毒剂作用的因素 ⑴消毒剂的性质 ⑵消毒剂的浓度 ⑶作用时间与其它环境条件 (4)微生物的种类与数量 消毒剂的性质、浓度与作用时间 微生物的种类与数量 温度 酸碱度 有机物 药物的相互拮抗 第三节 生物因素对微生物的影响 一 抗生素（antibiotics） 某些微生物在代谢过程中产生的一类能抑制或杀死另一些微生物的物质。 主要来源于放线菌（如链霉菌），少