FounderXLayout Document(JAB_2015_No2) - 农业生物技术学报.PDF

Online system: 农 业 生 物 技 术 学 报 Journal of Agricultural Biotechnology 2015, 23(2): 220~226 DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2015.02.009 miR-let-7a 在大白猪甲状腺中的表达及其对甲状腺细胞凋亡的影响 1 1 1 1 2* 1* 王云霞 王琪 周辉云 郭晓令 王颖 徐宁迎 1浙江大学动物科学学院，杭州3 10058；2 太原理工大学力学学院，太原030024 *通讯作者，wangying03@ ；nyxu@zj 要 microRNA(miRNA) 是一类内源性的非编码RNA，广泛参与细胞的生长发育、分化、增殖和凋亡 等 物学过程。为了研究miR-let-7a 对猪(Sus scrofa) 甲状腺的生长发育及甲状腺细胞凋亡的调控作用，本 研究利用免疫荧光技术鉴定了大白猪的甲状腺组织及体外培养的甲状腺细胞，利用实时荧光定量PCR (qRT-PCR)检测了miR-let-7a 在不同 长阶段大白猪甲状腺组织中的表达量变化，通过转染miR-let-7a mimics 并利用流式细胞术检测了转染组与未转染组的甲状腺细胞凋亡率的差异性，同时预测了miR-let-7a 与细胞凋亡相关 因的靶向关系。结果发现，甲状腺组织和细胞中的甲状腺球蛋白(thyroglobulin,TG) 发出 绿色荧光，表明体外培养的甲状腺细胞功能正常。qRT-PCR 结果显示，胚胎期随着胚龄的增加，miR-let-7a 表达量逐渐增加。出生后miR-let-7a 表达量下降，于60 日龄达生长期最小值，之后有所上升，至90 日龄后 其表达量再次下降，120 日龄后随日龄的增加let-7a 表达量呈现逐渐增加的趋 。凋亡结果发现，和对照组 相比，转染组细胞凋亡率明显升高(P＜0.05) 。根据研究结果推测，miR-let-7a 的表达直接或间接影响了甲 状腺细胞凋亡的调控过程。研究结果为深入研究猪甲状腺miR-let-7a 的功能机制提供了有益的线索。 关键词 miR-let-7a ，甲状腺细胞，细胞凋亡，靶 因 Expression Variation of miR- let- 7a in Thyroid and Its Effect on Apoptosis of Thyroid Cell of Yorkshire Pig(Sus scrofa) WANG Yun-Xia1 WANG Qi1 ZHOU Hui-Yun1 GUO Xiao-Ling1 WANG Ying2* XU Ning-Ying1* 1 College of Animal Science, Zhejiang University, Hangzhou 310058, China; 2 College of Mechanics, Taiyuan University of Technology, Taiyuan 030024, China * Corresponding authors, wangying03@; nyxu@zj Abstract microRNA (miRNA) is a class of endogenous and noncoding RNA, which involves in many physiological processes including cell growth, development, differentiation, proliferation and apoptosis. In order to study the regulation effect of miR- let- 7a on growth and development in thyroid, we