HPLC一荧光法测定兔血浆中羟基喜树碱的浓度 - 南京中医药大学学术 .PDF

维普资讯 南京中医药大学学报2OO6年 1月第22卷第 1期 一 50 一 10ffR～4￡OFNANJINGTCMUN~ RSITYVo1．22Ⅳo．1J∞ ．2O06 HPLC一荧光法测定兔血浆中羟基喜树碱的浓度 张海霞 ，方芸H，谈恒山 ，张晶晶 (南京大学医学院附属鼓楼医院，江苏 南京 210008；南京中医药大学药学院，江苏 南京 210029) 摘要：目的 建立高效液相色谱法(FIPLC)测定免血浆中羟基喜树碱含量的方法。方法 采用HPLC一荧光法。检测器激 发波长为363nnl，发射波长为550nnl，Ljc pherCl8色谱柱，流动相为乙腈一0．075mol／L醋酸铵缓冲液(pH6．4)(32：68， 含O．2％三乙胺)，流速 1．0mI／min，采用内标法测定浓度。结果 免血浆样品中羟基喜树碱与内标(喜树碱)峰分离良 好，内源性杂质不干扰样品峰，最低检测浓度为 1．0t-~／L。HCPF浓度范围在2．832～5800 L间呈线性相关，回归方程 为 Y=0．008596+0．004282C，相关系数为 r=0．9992，相对回收率分别为 1oo．0％一105．0％，日内和 日间变异均小于 15．0％。结论 本实验方法具有专属性，且灵敏、可靠。适用于HCPT类制剂给药后血药浓度的检测，有助于深入研究 HCPF在体内的药代动力学特征。 关键词 ：羟基喜树碱 ；高效液相色谱法；血药浓度；兔血浆 中图号 ：R285．5 文献标识码：A 文章编号：1000—5005(2oo6)ol一0050—03 羟基喜树碱 (hydroxycamptothecin，HCPT)是从 作站 、G1321A荧 光 检 测 器、G1311A 四元 泵、 中国特有的珙桐科植物喜树 (Camptothecaacttmi． G1379A在线脱气机组成；色谱柱：LichrospherCl8 nata)中分离出的一种吲哚类生物碱，它能通过抑 柱(250rnm×4．6llllTl，5a／n)，C18预柱(10mmx4．6 制DNA拓扑异构酶 I而使肿瘤细胞发生致死性 mm，5胛 ，江苏汉邦科技有限公司)；TGL-16G高 损害，为广谱抗肿瘤药物。近年来，随着羟基喜树 速台式离心机(上海安亭科学仪器厂)；SK．1型快 碱的新剂型、新疗法的不断开发 ，有必要建立血药 速混匀器(常州国华电器有限公司)；AG-240 型电 浓度的检测方法以满足药代动力学研究的需要。 子分析天平(上海梅特勒．托利多公司)。 目前有关血浆中HCPT及CPT含量测定的文献报 1．3 实验动物 道有紫外分光光度法、荧光分光光度法等[1,2]。 新西兰兔，雌雄兼用，2．0 2．6ks(江苏省农 本文建立了采用高效液相一荧光法测定兔血 科院动物房)。 浆中羟基喜树碱浓度的方法，具有简便实用、准 2 方法与结果 确、灵敏度高等特点，可以为羟基喜树碱在兔体内 2．1 药液配制l3J 的药物动力学研究提供可靠的检测方法。 取羟基喜树碱和喜树碱标准品适量，精密称 1 材料 定 ，溶于0．01mol／L枸橼酸 乙腈 (1：1，v／v)中制 1．1 药品与试剂 得标准溶液。 羟基喜树碱(HCPT)和喜树碱(CPT)对照品由 2．2 色谱条件 湖北李时珍药业有限公司提供；羟基喜树碱注射 Agilentl100HPLC．荧光分析系统；荧光检测 液为黄石飞云制药有限公司产品，批号：041001； 器Ex波长363nm、Em波长550nm；LichrospherCl8 乙腈为色谱纯，其它试剂均为分析纯。 柱；柱温30cc；流动相：乙腈．0．075mol／L醋酸铵 1．2 仪器与设备