甘薯及根腐病相关AFLP标记筛选.doc

甘薯及根腐病相关AFLP标记筛选摘要：甘薯根腐病是由甘薯根腐病病原菌［Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｏｌａｎｉ（Ｍａｒｔ．）Ｓａｃｃ． ｆ． ｓｐ． ｂａｔａｔａｓ ＭｃＣｌｕｒｅ，简称ＦＳＢ］引起的一种真菌性毁灭性病害，传播途径广，蔓延速度快，近年有向长江流域以南地区传播的趋势，对甘薯生产造成极大危害。在已有的徐薯１８与胜利百号Ｆ１分离群体抗性鉴定的基础上，采用分离群体混合分析法（Bｕｌｋｅｄ sｅｇｒｅｇａｎｔ ａｎａｌｙｓｉｓ，ＢＳＡ）与AFLP技术相结合，通过筛选８０对引物，定位与甘薯根腐病相关的分子标记，在感病群体中定位到一个显性标记，即标记Ｅｃｏ（４５）－Ｍｓｅ（４５）被发现与感病基因连锁。所获试验结果对甘薯抗病遗传改良具有指导意义 关键词：甘薯根腐病；ＡＦＬＰ标记；分离群体混合分析法 中图分类号：Ｓ５３１；Ｑ３４３．１＋７ 文献标识码：Ａ 文章编号：0439－８114（２０11）24－5254-02 Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ＡＦＬＰ Ｍａｒｋｅｒｓ Ｌｉｎｋｅｄ ｔｏ Ａ Ｌｏｃｕｓ Ｃｏｎｆｅｒｒｉｎｇ Ｉｎｄｕｃｉｄｅｎｃｅ ｔｏ Ｒｏｏｔ Ｒｏｔ ｉｎ Ｓｗｅｅｔｐｏｔａｔｏ ＳＵ Ｗｅｎ－ｊｉｎ１，ＷＡＮＧ ｌｉａｎ－ｊｕｎ１，ＬＥＩ Ｊｉａｎ１，ＺＨＡＯ Ｔｉａｎ－ｙａｏ２，ＳＨＵＡＩ Ｑｉｕ－ｊü２，ＹＡＮＧ Ｘｉｎ－ｓｕｎ１ （Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｆｏｏｄ Ｃｒｏｐｓ， Ｈｕｂｅｉ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ， Ｗｕｈａｎ ４３００６４， Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ： Ｔｈｅ ｒｏｏｔ ｒｏｔ ｏｆ ｓｗｅｅｔｐｏｔａｔｏ ｉｓ ｃａｕｓｅｄ ｂｙ ＦＳＢ，ｉｔ ｈａｓ ｍａｎｙ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ｗａｙｓ，ａｎｄ ｔｈｅ ｓｐｅｅｄ ｉｓ ｉｎｃｒｅｄｉｂｌｅ，ｉｔ ｂｒｉｎｇｓ ａ ｈｕｇｅ ｈａｒｍ ｔｏ ｔｈｅ ｉｎｄｕｓｔｒｙ ｏｆ ｓｗｅｅｔｐｏｔａｔｏ．Ｉｎ ｔｈｉｓ ｓｔｕｄｙ，ｔｈｅ Ｆｌ ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ ｄｅｒｉｖｅｄ ｆｒｏｍ ｔｈｅ ｃｒｏｓｓ ｏｆ Ｘｓｕｓｈｕ １８ａｎｄ Ｓｈｅｎｇｌｉ １００ｗａｓ ａｎａｌｙｚｅｄ ｆｏｒ ｉｔｓ ｒｏｏｔ ｒｏｔ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ．Ｔｈｅ ｉｎｄｕｃｉｄｅｎｃｅ ｏｆ ｓｗｅｅｔｐｏｔａｔｏｒ ｔｏ ｒｏｏｔ ｒｏｔ ｗａｓ ｐｒｏｖｅｄ ｔｏ ｂｅ ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ ｂｙ ａ ｇｅｎｅ ｉｎ ａ ｄｏｍｉｎａｎｔ ｍａｎｎｅｒ．Ｂｕｌｋｅｄ ｓｅｇｒｅｇａｎｔ ａｎａｌｙｓｉｓ（ＢＳＡ）ｗａｓ ｃｏｎｄｕｃｔｅｄ ｔｏ ｓｃｒｅｅｎ ８０ ＡＦＬＰ ｐｒｉｍｅｒ ｐａｉｒｓ． Ａ ｍａｒｋｅｒ ｄｅｓｉｇｎａｔｅｄ ａｓ Ｅｃｏ（４５）－Ｍｓｅ（４５） ｗａｓ ｆｏｕｎｄ ｔｏ ｂｅｌｉｎｋｅｄ ｔｏ ｔｈｅ ｒｅｓｉｓｔａｎｔ ｌｏｃｕｓ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： ｓｗｅｅｔｐｏｔａｔｏ ｒｏｏｔ ｒｏｔ； ＡＦＬＰ ｍａｒｋｅｒ； BSA 甘薯是世界上重要的粮食、饲料、工业原料及新型能源作物，我国是世界上最大的甘薯生产国家，甘薯年种植面积为３８６万ｈｍ２，鲜薯总产量８ １２１万ｔ。甘薯以其单位面积生物能产量高，且具有抗旱、耐瘠薄、适应性广、块根淀粉含量高等特性，是我国重要的淀粉类能源作物，在国家粮食安全、能源安全、生态安全、健康安全和农民增收等方面起着重要作用［１］。目前甘薯根腐病作为一种真菌性病害已经成为制约我国甘薯生产的三大严重病害之一，一般发病地块减产１０％~２０％，重病地块植株成片死亡甚至绝产。为控制甘薯根腐病的危害，提高甘薯种植效益，就甘薯根腐病进行分析研究十分必要［２］ 甘薯根腐病至今尚无有效的防治药剂，目前生产上对该病的防治主要以化学药剂防治为主，易引起农药残毒和环境污染，而且真菌能产生耐药性。不同的甘薯品种对甘薯根腐病的抗性有显著差异，选用甘薯抗病品种是防止甘薯根腐病发生和减轻病害的最经济有效的方法，相关研究表明甘薯根腐病抗性主要以基因加性效应控制，Ｆ１代抗病能力变异广，病情指数呈连续性变异。甘薯对根腐病的抗性是稳定的，同一条件下，不同年份变化不大［３］。不同抗病类型的亲本进行组合，Ｆ１可出现抗性不同的材料，其中高抗、抗、感、高感类型都有。总的趋势表现为双亲抗性水平越高的组合，其后代中出现高抗或抗病型的比例就越高［２］ 研究将ＡＦＬＰ技术与分离群体混合分析法（Bｕｌｋｅｄ ｓｅｇｒｅｇａｎｔ ａｎａｌｙｓｉｓ，ＢＳＡ）相结合，通过筛选８０对引物，获得了一个与甘薯根腐病基因位点连锁的ＡＦＬＰ标记［４］，所获试验结果对甘薯抗病遗传改良具有指导意义 １ 材料与方法 １．１ 材料 以高抗甘