利用分光光度计研究玻璃PLOT柱载体层涂敷技术-色谱.PDF

[5]E.F.Barry,J.H.Hubballetal.,Am.Lab.,15(10 )4(1983)。 [6]J.A.Hubball,P.R.,DiMauroet.al.,J.Chromatogr.Sci.,22(5),185(1984)。 [7] G.Schomburgetal.,Chromatographia,12(10) ，651(1979)。 [8] 康星武等，分析化学，4,273(1982)。 [9] W.Bertsch,V.Pretoriusetal.,HRCCC,5(8),432(1982)。 （收稿日期：1985年5月31日） 利用分光光度计研究玻璃PLOT柱载体层涂敷技术 刘占先 孔 伟 （山东省化学研究所，济南） 有机胶法制备多孔层开管柱 P（LOT柱），是中国科学院兰州化学物理研究所提出的一 种具有我国特点的制柱方法[1]。该法已在我国得到推广[1-4]。这种制柱方法的关键步骤在 于载体层涂敷，其它步骤均与制备壁涂开管柱相同。在制柱中，无论 “先拉后涂”还是 “先涂 后拉”，都必须力求涂层均匀，多孔层增厚，以提高柱效和样品负荷量。该所利用扫描电镜 观察涂布效果，而一般实验室则只靠肉眼观察。我们按文献[2-3]进行玻管涂敷，利用改装的 分光光度计比较涂敷效果，研究涂敷条件，探讨涂敷机理。通过研究，找到一种能在相当宽 pH值范围内使用的新有机胶。 实 验 部 分 一（）仪器与试剂 1．仪器：72型分光光度计；微电流放大器及电子电位差计。2．试剂：1)兰州有机胶，中 国科学院兰州化学物理研究所产；2)明胶，英国B.D.H.产品；3)阿胶，山东东阿县产；4) 蛋白胨，上海东海制药厂产；5)济南有机胶，本所合成。 二（）分光光度计的改装及测试方法 方法A：分光光度计原封不动，加工一块与光径长度10毫米比色皿体积相等的塑料块，沿 垂直方向开一小孔，内径恰好使拉伸前玻管通过；西侧开一狭缝 见（图1 。将此管座与比 色皿并列放入比色皿架中，以空白比色皿为基准，使其毛玻璃面对准单色光 6（20nm ，调节 光亮度旋钮，使检流计读数为零，然后移动皿架使管座进入光路，将涂后吹干的玻管插入， 旋转玻管，测定不同方向的透光度，得玻管两端透光度的平均值。 方法B：在分光光度计比色皿暗箱上方设管座，座上方设光电池。将比色皿架取出，放入 一小片平面镜，使单色光方向改变90，通过狭缝进入光电池。输出信号经微电流放大器放 大后，用电子电位差计记录透光率，见图2测定时利用微电流放大器的基流补偿旋钮调节记 录笔起始位置，然后重复打开出光狭缝，记录透光度3次。将玻管逐渐推进，记录不同部位的 透光度 。 （三）载体壁涂条件的研究 1．涂敷次数与透光度关系 有机 胶用明胶，按方法A测试。每涂一遍， 测定玻管两端透光度各11次，结果见 图3。 2．载体悬浮液PH值与透光度关 系 用不同有机胶，改变载体悬浮液 的PH值，按方法A测定平均透光度， 结果见图4。曾重复测定用兰州有机 胶时载体悬浮液的最佳PH值。结果 均如图4中曲线3所示，在PH值为3.6 处明显改变方向，与文献[3]根据板高 与PH值关系得出的最佳PH值吻合。 3．涂层厚度与均匀性关系 配制两种浓度相同的有机胶，将载体悬浮液分别调节至各 自的最佳PH值，其它涂敷条件相同，按方法B测定透光度，结果见图5。 4．载体悬浮液浓度及温度对壁涂的影响 在实验范围内，涂层厚度随悬浮液浓度增加 而增加，见图6。环境温度以20-30 为宜，见图7。 （四）涂敷机理讨论 载体悬浮液是多相物，除载体 悬浮物外，尚含硅胶。固体粒子能 自由地吸附溶液中的离子，形成带 有一定 电位的双电层，是它 暂时 稳定的原因[5。可以设想载体壁涂 是吸着在玻璃表面带正电荷的聚合 物分子或离子，遇到带负电荷的硅 胶及载体悬浮物，由于相互吸引和 放电作用而沉积，沉积物包括上述 两者。硅胶的电荷是先由表面层的 SiO2与水分子作用生成H2SiO3， 再进行电离而形成，酸的加入会影 响其稳定性。因此，当pH值太小 时常观察到硅胶的