博落回根中生物碱的组织化学定位研究.PDF

中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 47 卷 第 10 期 2016 年 5 月 • 1785 • 博落回根中生物碱的组织化学定位研究 1, 2 2 4 2 1, 2, 3* 左 姿 ，郑亚杰 ，梁之桃 ，邹剑峰 ，曾建国 1. 湖南中医药大学药学院，湖南 长沙 410208 2. 湖南农业大学兽用中药资源与中兽药创制国家地方联合工程研究中心，湖南 长沙 410128 3. 植物功能成分利用协同创新中心，湖南 长沙 410128 4. 香港浸会大学中医药学院，香港 九龙 摘 要：目的 建立激光显微切割结合HPLC-MS/MS 技术测定博落回根不同组织中血根碱、原阿片碱、别隐品碱、白屈菜红碱、二 氢白屈菜红碱和二氢血根碱的定量分析方法，开展博落回根的组织化学研究。方法 利用激光显微切割技术将两年生不同生长期博 落回根的木栓层、皮层、韧皮部、木质部维管束和木射线进行切割，HPLC-MS/MS 对切割的组织进行目标生物碱的检测。结果 6 种生物碱均有较宽的线性范围和良好的线性关系（r2 ＞0.996 6）；日内、日间精密度RSD 均小于 2.4%；检出限和定量限最高分别为 0.29、0.57 ng/mL；重复性试验RSD 均小于 13.2%；加样回收率为85.1%～133.9%，RSD 值为 9.4%～20.7% 。苗期根的上述5 个组织 中6 种生物碱的总量分别为0.14、0.10、0.07、0.16、0.11 2 2 μg/mm ；花期分别为0.38、0.22、0.15、0.41、0.26 μg/mm ；果期分别为0.46、 0.29、0.27、0.55、0.22 μg/mm2 2 ；果后期分别为0.52、0.29、0.24、0.41、0.23 μg/mm 。结论 基于激光显微切割和LC-MS/MS 的组 织中生物碱的定量分析方法分辨率高、专属性强、灵敏度好、准确可靠；博落回根中6 种生物碱主要分布在木栓层和木质部维管束。 关键词：博落回；生物碱；组织化学；激光显微切割；HPLC-MS/MS 中图分类号：R286.022 文献标志码：A 文章编号：0253 - 2670(2016)10 - 1785 - 06 DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2016.10.026 Histochemical localization study of alkaloids in root of Macleaya cordata 1, 2 2 4 2 1, 2, 3 ZUO Zi , ZHENG Ya-jie , LIANG Zhi-tao , ZOU Jian-feng , ZENG Jian-guo 1. School of Pharmacy, Hunan University of Chinese Medicine, Changsha 410208, China 2. National and Provincial Union Engineering Research Center for the Veterinary Herbal Medicine Resources and Initiative, Hunan Agricultural University, Changsha 410128, China 3. Hunan Co-Innovation Center for University of Botanicals