嗣亏多缠猫舫钾.PDF

维普资讯 “ 一 嗣 亏多缠猫 舫钾 上海医学检验杂志 1995年第 10卷第 1期 柯萨奇 B组病毒 IgM、IgA抗体测定及临床应用 南京军区南京总医院微生物科 (210002) 熊 华 李芳秋 胡进军 杨毓华 李保仝 柯萨奇B组病 毒 (CBV)能侵犯人体多种器官 ， 10 小牛血清PBS稀释．加入 微孔扳 ．43℃50rain， 引起广泛的临床症状，如发热、肺炎、上感、儿童及成 洗涤、加HRP一抗人SIG．43CSOmlu 结果 断粪同 人心肌炎、无菌性脑炎等 “]，对人类健康造成严重影 三、幢测标本 待测血清取 自田不踞原因发热 响。目前的实验室诊断尚不能满足临床需要 t病毒分 而住院患者 4o倒 ，肺炎 4o例，上感 6o例 ，年龄 6～ 离和中和试验检测抗体币易常规开展 ，ELISA检测 75岁。同期门诊健康体检者血清 100份作对照。 IgG抗体的应用则困该组病毒常引起隐性感染、人 结 果 一 群中存在一定抗体水平而受到限制。困此 ，我们建立 、 方法学研究 了检测CBV—IgM及 SIA抗体的ELISA法 ，以期有 l_标本稀释液 中抗 人 IgG维度 筛选 取已知 助于该组病毒感染的诊断 抗CBV—IgG 阳性血清 ，分别用 1 、2 、5 浓度羊 材 料 和 方 法 抗人 IgG作标本稀释液 ．结果 l 浓度即可将CBV 一 、 试剂 SIG与抗原的反应 阻断 60 以上，故测定kM、IgA 1．病毒抗原制各 JCBV1～6型分别感染 Hela 时 ．选用 1 车抗人 IgG做标本稀释液。 细胞，细胞病 变 (CPE)达卅时收获，冻融 3攻，4℃ 2．特异性及 重复性 CBV—IgM 阳性血清用浓 800~／nfin离心 30mln，弃细胞碎片沉渣 感染上清 度 0．1mol／L二琉基 乙醇处理后再 用 法测 定 ．结 按{直量的 8 (WlV)~D入聚 乙二醇 (PEG6000)，充 果全部转阴 另用本法测类风湿 日子 阳性 (ELISA 分溶解混匀，置 4：C过夜。100OOr／min离心 30min． 法 ，滴度1：10)标本 ．CMV—IgM 阳性标本 ．结果全 弃上 清，沉 淀 用少量 STE 液 (0．1raol／L NaC1- 部阴性 }取阳性及 阴性血清各 1O份 ，分别在一 ．卜月 0．02mol／LTris，0．002otol／LEDTA，pH7．4)混悬 ． 内检测 4攻 ，结果吸光度值在允许误差范 围内。 即为 CBV抗原 。同样制备未感染细胞抗原作对照 ． 3．待测标车稀释度的选择 经测试健康体检 一 2Oc保存 。 者血清，85 为 CBV IgM 1t200阳性 ，l：400、I：800 2．I-IRP-抗人 链 McAb、HRP一抗人 IgG、HRP一 阳性率分别为 l6 和 2 ，故正式试验选择 l：