畜禽养殖技术模块实训指导 项目三　玻璃器皿的消毒灭菌技术.doc

项目三　玻璃器皿的消毒灭菌技术 ? 一、技能目标 本项目是畜牧兽医、畜牧、兽医、动物营养与饲料、兽医卫生检验专业学生必需掌握的一项基本技能，要求学生熟练掌握玻璃器皿的消毒灭菌的基本要求与操作方法。 二、教学资源准备 （一）材料与工具　 高压消毒器、玻璃器皿、洗涤灵、75%酒精、1%～2%盐酸溶液、1%～5%苏打、5%石炭酸、2%～3%来苏儿、毛刷或试管刷、干燥箱、铜丝筐、玻筒、搪瓷盆。 （二）实训场所　 校内实验室 （三）师资配置　 实训时每班配备1名教师，技能考核时配备2名教师。 三、原理与知识 新购入玻璃器皿常附有游离碱质，不可直接使用，需用1%～2%盐酸溶液中浸泡数小时来中和其碱质，然后再用洗涤灵及清水刷洗以除去遗留的酸质。用后的玻璃器皿容易被各种油脂、污垢或病原微生物沾污，在洗涤后必须进行严格的消毒，消毒后再洗涤（生物用的玻璃器皿包装后再次灭菌），烘干后备用。 四、操作方法及考核标准 （一）玻璃器皿的消毒方法 1．一般玻璃器皿（如平皿、试管、烧杯、烧瓶等）均可置高压消毒器内，一般蒸气压力在0.1～0.137×106Pa，温度可达121.6～126.6℃，时间为20～30min。 2．吸管、载玻片、盖玻片等可浸泡于5%石炭酸或2%～3%来苏儿中48h。若其中有炭疽材料时，还应在上述消毒溶液中加入3%的盐酸，浸泡吸管的玻璃筒底部应垫以棉花，以防投入吸管时管尖破裂。 3．盛有固体培养基（如琼脂）或沾有油脂（如液体石蜡或凡士林等）的玻璃器皿应在消毒后，随即趁热将内容物倒净，用温水冲洗，在5%洗涤灵溶液中煮沸5min（或浸泡12h小时左右），然后以清水反复冲洗数次，再用蒸馏水反复冲洗数次后，放入烘干箱中，烘干后包装、灭菌待用。 (二)玻璃器皿的洗涤 1．将消毒处理过的玻璃器皿浸泡于水中，用毛刷或试管刷涂上洗涤灵，刷去油脂和污垢，然后用自来水或清水冲洗数次。 2．经清水冲洗后，如发现玻璃器皿上尚有油迹时，可置于1%～5%小苏打溶液或5%洗涤灵中煮沸30min，再用毛刷除去油脂和污垢，最后用清水或蒸馏水冲洗干净。 3．吸管洗涤难度大，需要小心，绝不能粗鲁急躁，兹将洗涤步骤分述如下： （1）将吸管从消毒剂中取出后，先用细铁丝取出管口的棉塞，若棉塞太紧不易取出时，可将铁丝尖端压扁，插入棉塞与管壁之间，轻轻一转即可将棉塞拉出。 （2）将吸管浸泡于5%洗涤液中，缠纱布或棉花少许于一细铁丝尖端上，用以刷洗管内的油脂和污垢，铁丝尖端的纱布或棉花应随时更换。 （3）拿橡皮管一根，一端接冲洗球，一端接吸管的尖端，在流动的清水或自来水中反复冲洗数次，最后用蒸馏水冲洗数次，倒立于垫有纱布的铜丝筐中干燥。 （三）玻璃器皿的干燥? 洗净的玻璃器皿通常倒插于干燥架上，令其自然干燥，必要时亦可放入50℃左右干燥箱中，以加速其干燥，干燥后用干净的纱布或毛巾拭去干后的水迹。 （四）玻璃器皿的包装? 1．一般玻璃器皿的包装? 用预先做好的大小适宜的棉塞或纱布棉塞将试管或三角瓶口塞好，外面再用纸张包扎，烧杯可直接用纸张包扎。 2．棉塞的制作? 最好选择纤维长的新棉花做棉塞（脱脂棉不能用），即先取适量棉花分成数层互相重叠，使其纤维纵横交叉，然后折叠卷紧，做成长约4～5cm的棉塞。 3．塞棉塞时要求? 棉塞宜慢慢旋转塞入，塞入部分和露出部分的长度大约相等，棉塞的大小、长短、深浅、松紧均须合适，要求试管的棉塞易于拨出为佳。 4．吸管的包装? 先用细铁丝或长针头塞少许棉花于吸管口端，塞进的棉花要大小适中，然后将吸管分别用纸包裹，再用麻纸或报纸每10支包成一束（包装时要求吸管口端位于包扎纸张折叠的一端），置于金属筒中消毒。 5．平皿、培养扁瓶、青霉素瓶等，用无油质的纸将其单个或数个包成一包，置于金属盒内或直接进行消毒。 （五）载玻片盖玻片的处理 用过的载玻片和盖玻片须分别浸泡于2%来苏儿或5%石炭酸溶液内消毒，48h后取出，置5%洗涤液中煮沸30min，再用清水冲洗干净后，拭干保存或浸于75%酒精中以备后用。 （六）玻璃器皿用前的消毒 ? 普通玻璃器皿在用前使用干热消毒法（160～180℃，1～2h）进行消毒，也可用高压消毒法消毒。 （七）云雾状玻璃器皿的处理 凡玻璃器皿上有云雾状的且不能用普通方法洗净者，可用3%苏打水等清洁液浸泡24h，再以清水洗去清洁液，然后用洗涤灵洗刷干净为止，若仍洗不净者弃之，清洁液可重复使用多次，直至其颜色变为蓝绿色或黑色为止。 （八）技能考核标准 考核内容及 分数分配 操作环节 与要求 评　分　标　准 考核 方法 熟练 程度 时限 分值 扣　分　依　据 玻璃器皿消毒灭菌技术 ? （100分） ①实验操作 40 以抽签形式任选五种玻璃器皿进行消毒灭菌操作，每错一种扣8分 单人操作考核 掌握 30min ②规范程度 30 操作不规