MHC抗原加工递呈HLA―DO基因多态性及HCV感染易感性分子流行病学探究.docVIP

MHC抗原加工递呈HLA―DO基因多态性及HCV感染易感性分子流行病学探究 　　【摘要】 目的 探?主要组织相容性复合体（MHC）抗原加工递呈相关基因HLA-DOA和HLA-DOB多态性与丙型肝炎病毒（HCV）易感性的关系。方法 选取994例静脉注射吸毒人群， 均进行检测血清中抗-HCV， 将抗-HCV阴性者493例作为抗-HCV阴性组， 抗-HCV阳性者501例作为抗-HCV阳性组。分析HLA-DOA和HLA-DOB基因SNPs与HCV感染易感性的关系以及环境-基因的交互作用。结果 研究对象中年龄最小12岁， 最大64岁， 抗-HCV阳性组平均年龄（36.0±7.5）岁， 抗-HCV阴性组平均年龄（34.0±7.9）岁；抗-HCV阳性组年龄略高于抗-HCV阴性组， 差异有统计学意义（P0.05）；非深圳户籍人口抗-HCV阳性率（51.8%）略高于深圳户籍（40.0%）， 差异有统计学意义（P0.05）. Migrant population without registered Shenzhen residence had higher positive anti-HCV rate （51.8%） than drug abuse population with registered Shenzhen residence （40.0%）， and the difference had statistical significance （P 　　【Key words】 Hepatitis C virus； Genetic polymorphism； Antigen processing machinery； Infection outcome； Chinese population 丙型肝炎（简称丙肝）是由HCV（hepatitis C virus）感染引起的一种肝脏疾病， 主要经血液传播， 人类对HCV普遍易感。丙肝在普通人群中的感染率约为3.2%， 在吸毒人群中可达18.30%～66.97%， 静脉注射吸毒人群更是高达75%[1， 2]。宿主在HCV感染后不同的临床发展过程， 除了与病毒株的性质相关， 也与宿主自身的遗传背景相关。人类白细胞抗原（human leucocyte antigen， HLA）是人类的主要组织相容性复合体（major histocompatibility complex， MHC）， 宿主对HCV的细胞免疫反应很大程度上取决于人类HLA基因系统所编码的HLA分子对病毒表位的加工和递呈[3]。因此， HLA基因的多态性改变可能会影响HCV的感染和转归。HLA-DO属于HLAⅡ类基因， DO分子是HLA-DM分子功能的负向调节蛋白， 从而影响外源性抗原的加工递呈过程[4]。本研究运用分子流行病学检测手段进行病例-对照研究， 比较抗-HCV阳性者和抗-HCV阴性者中HLA-DO基因多态性的分布差异， 探讨HLA-DO基因多态性与HCV感染易感性的关系 1 资料与方法 1. 1 一般资料 选取的994例吸毒人员来自于“十一五”和“十二五”国家科技重大专项：“深圳市艾滋病、病毒性肝炎社区综合防治研究”项目建立的吸毒人群队列、深圳市司法局第一强制隔离戒毒所的戒毒人员以及深圳市美沙酮门诊受治者， 本研究采用分子流行病学研究的病例对照设计。所有纳入对象均进行检测血清中抗-HCV， 将抗-HCV阴性者493例作为抗-HCV阴性组， 抗-HCV阳性者501例作为抗-HCV阳性组。采用专门设计的“药物滥用监测调查表”对吸毒人员进行调查， 在知情同意的基础上由专业人员经过培训后对调查对象进行逐项询问填写， 内容包括社会人口学资料、吸毒史等 1. 2 ??验室检测 经知情同意后， 采集研究对象空腹静脉血5 ml， 分离上层血清、中间层白细胞和下层红细胞， 分别置1.5 ml 离心管中， -20℃冷冻保存。抗-HCV检测采用酶联免疫吸附法（enzyme-linked immunosorbent assay， ELISA）。诊断试剂由北京万泰生物药业有限公司提供， 均严格按照试剂盒说明书操作与判断结果。检测仪器使用芬兰雷勃Multiskan MK3 中文酶标仪， 洗板机为Bio-Tek 公司ELx50 型号。基用蛋白酶K和酚-氯仿处理白细胞， 提取基因组DNA。采用TaqMan探针方法， 使用ABI Prism?7900HT型荧光定量PCR仪对HLA-DOA、HLA-DOB基因多态位点进行基因分型 1. 3 统计学方法 采用SPSS20.0统计学软件进行数据统计分析。计量资料以均数±标准差（ x-±s）表示， 采用t检验；计数资料以率（%）表示， 采用χ2检验；影响因素Logistic回归分析。P0.0