Livin基因在食管癌中的表达及意义.pdfVIP

苤医药2007年第47卷第36期 Livin基因在食管癌中的表达及意义 刘英明。张理宾 (九江学院附属医院，江西九江332000) [摘要] 采用免疫组织化学sP法检测50例经手术病理证实的食管癌患者的癌组织标本及其相应癌旁t6 cm的正常食管组织标本中Livin基因表达情况，结果癌组织中Livin阳性率明显高于正常组织，且与食管癌组织的 分化程度、浸润深度及淋巴结转移相关。提示Livin基因与食管癌的发生、发展密切相关。 [关键词] Livin；人类凋亡抑制蛋白；食管肿瘤 [中图分类号] R735．1 [文献标识码] B [文章编号] 1002．266X(2007)36-0066-02 人类凋亡抑制蛋白(IAPs)是一类重要的抗细胞 者之和0分为阴性，1～2分为弱阳性，3～4分为阳 凋亡因子，其在细胞的凋亡和肿瘤发生过程中具有 性，5～6分为强阳性。 重要的影响作用。Livin是2000年发现的IAPs新成 1．4 统计学方法 采用SPSS11．0统计软件。率的 员，特异性的表达于人的胚胎组织及人类实体瘤细 比较采用 检验。P≤o．05为差异有统计学意义。 胞和组织中 。为探讨Livin在食管癌发生、发展中 2 结果 的作用，2006年6月～2007年6月，我们检测了5O Livin基因在食管癌中的表达及其与病理特征的 例食管癌患者癌及癌旁组织中Livin基因的表达情 关系，见表1。 况。现报告如下。 表1 食管癌中Livin基因表达及与肿瘤病理特征的关系 1 材料与方法 1．1 临床资料 选取我院同期经手术病理证实的 食管癌组织标本及其相应癌旁16 cm的正常食管组 织标本各5O例。其中男4O例，女1O例；年龄45～ 7O岁，平均56．5岁。其中食管鳞癌48例，腺癌2 例；组织分化程度：低分化5例，中分化25例，高分 化20例；存在淋巴结转移2O例。所有患者术前均 未经放、化疗治疗。 1．2 检测方法 所有标本取材后均经10％福尔马 林固定，常规石蜡包埋，制成4 m切片。兔抗人 Livin多克隆浓缩型抗体为美国BIOCHEMICALS公 司产品，抗体工作浓度为1：100。检测方法采用免疫 注：同一病理特征内相比，‘P0．05 组织化学染色sP法，PCR引物由大连宝生公司合 3 讨论 成。以PBS缓冲液代替一抗作为阴性对照组，已知 Livin基因位于染色体20q13．3，全长4．6 kb，包 阳性片作为阳性对照。 括7个外显子和6个内含子，含有一个BIR结构域 1．3 判断标准 细胞质出现棕色颗粒即为Livin阳 及一个RNG结构域，有 、B两种异构体 J。 性。每张切片随机选取1O个高倍视野，每个高倍视 Livin抑制细胞凋亡作用主要通过其BIR区与 野计数100个癌细胞，观察阳性细胞染色强度，计数 caspase结合，抑制caspase活性，尤其是抑制caspase． 阳性细胞百分数。首先按染色强度记分：无染色为0 3、7、9的活I生，达到阻断凋亡受体及以线粒体为基础 分，浅染色为1分，中度染色为2分，强染色为3分； 的凋亡途径而起作用。Livin与caspase的结合抑制 阳性细胞数所占百分比记分：阳性细胞数5％为0 作用具有高度的特异性和亲和性，这有赖于其BIR 分，～25％为1分，～50％为2分，50％为3分；两 结构域的完整，BIR结构域内单个氨基酸的突变即 66 山 医药2007年第47卷第36期 可导致Livin与caspase的结合能力及Livin抗细胞 激因子的抵抗能力。 凋亡作用的明显降低甚至完全丧失。而 Livin的 本研究显示，Livin表达食管癌癌组织中明显高 RNG结构域对细胞凋亡不起作用，这与其他IAP家