飞行时间质谱-仪器信息网.PPT

从原理知检测离子的质荷比没有上限，特别适于生物大分子的测定,如测定单克隆的人免疫球蛋白，分子量高达982000±2000u； 要求离子尽可能同时开始飞行，故适于与MALDI的电离过程相配， MALDI-TOF成为完整的术语； 不同质荷比离子同时检测，灵敏度高； 扫描速度快，适于研究极快的过程； 结构简单，便于维护。 * * JILIN UNIVERSITY RESEARCH CENTER FOR DRUG METABOLISM 2005年5月30日 中国.长春 飞行时间质谱仪工作原理及应用 顾景凯　教授 吉林大学药物代谢研究中心 JILIN UNIVERSITY RESEARCH CENTER FOR DRUG METABOLISM 飞行时间质谱仪历史 飞行时间质谱计始于20世纪40年代，但由于当时电子技术和仪器设备的落后，仪器分辨率不到100，很难推广应用。随着时间的推移和科学技术的进步，这类仪器得到不断的发展，到80年代末，Hillenkamp等发明了基质辅助激光解吸电离的新方法之后，将这新的电离方法与飞行时间质谱组合成一种新型仪器——基质辅助激光解吸电离／飞行时间质谱(Matrix-Assisted Laser Desorption Ionization/Time of Flight，MALDI／TOF)，使飞行时间质谱的应用迈进了一个崭新的时代，把测定分子量的范围扩展到几十万原子质量单位(u)。 飞行时间质谱仪 一般情况，MALDI／T()F MS的灵敏度达到10-15mol量级，准确度达到0.1％-0.01％的水平，因而，飞行时间质谱计便成为生命科学领域中重要分析工具，在多肽、蛋白质、糖、核昔酸、高聚物的分析中得到广泛应用； Ｃ60及其衍生物、稀土元素络合物、金属络合物及某些挥发性很低非极性及分子量较大的有机化合物，用有机质谱测试很难得到信号，而用MALDI／TOF-MS测试，则可以得到非常理想的谱图； 飞行时间质谱分线性及反射模式两类； 经典的线性飞行时间质谱包括电子轰击源、圆筒式飞行管、检测器和记录系统等部分。性能较好的商品仪器既有线性模式也具有反射模式，其装备简图如图。 MALDI／TOF-MS 装备图 图中 (i)样品靶：设置的样品位置分别有8个、24个、48个、96个直至384个；(ii)激光器：337nm氮气激光器(Nd-YAG激光器．同时可安装紫外和红外之间的简便切换)；(iii)检测器：微通道板或高速双微通道板；计算机控制线性模式与反射模式之间的切换。 Q-TOF 飞行时间质谱仪工作原理 质荷比与时间的平方成正比，只要测定出飞行时间，就可换算成质荷比。在检测时，显然是质荷比小的先到达检测器，质荷比大的后到达。在通常情况下，离子的飞行时间为微秒数量级。 Q-TOF　全扫描 Q-TOF　子离子扫描 Q-TOF　前体离子扫描 飞行时间质谱仪的性能指标 分辨率 RP = M / ?M （M:为测定的质量， ?M:半峰高的峰宽） 线性模式，分辨串较低；反射模式，分辨率可高达15000 “延迟引出”（DE）技术或称“脉冲离子引出”（PIE） 质量范围 目前的商品仪器．—般可测到几十万原子质量单位（u） 飞行时间质谱仪的特点 优点: 　a).可获得高分辨质谱； 　 b).可实现快速的离子传输; 　c).可以较好地与脉冲离子化电离技术联用，如：MALDI等; 　d).高的离子传输效率; 　 e).利用post-source decay (PSD) 技术可以快速实现MS/MS技术; 　　　　f).具有较宽的质量范围； 　　　　g).利用ToF-ToF可以实现MS/MS. 　　 缺点: a).需要以脉冲开关; b).需要快速数字转换器; c).有限的动态范围. 应用: a). MALDI-ToF ； 　　　 b). GC/EI(CI)-ToF ； c).可用于有机化合物的分析； e).生物大分子的分析; f).肽谱 飞行时间质谱仪在药物分析中应用举例 MALDI-TOF反射模式： Q-TOF 分析中应用举例