食用绿藻(含制品)中脱镁叶绿酸盐检验方法1适用范围：本检验方法.PDF

72 年3 月22 日衛署食字第422070 號公告 食用綠藻 含製品( 中脫鎂葉綠酸鹽檢驗方法) 1. 適用範圍：本檢驗方法適用於食用綠藻含製品( 中脫鎂葉綠酸鹽之) 檢驗。 2. 檢驗方法： 2.1. 裝置： 2.1.1. 離心機：轉速可達3000 rpm 以上者。 2.1.2. 培養箱：能維持內部溫度差異在±1℃以內者。 2.1.3. 光電比色寄或分光光度計：應具有可視光波長部份。 2.2. 試藥： 精製海砂、丙酮、乙醚、硫酸鈉、無水硫酸鈉、鹽酸均採用 試藥級。無水磷酸氫二鈉、磷酸二氫鉀均採用試藥特級。 2.3. M/15磷酸鹽緩衝溶液 (M/15 Phosphate buffer, pH8.0)之調製： 原液 A ：精確秤取9.073 g磷酸二氫鉀溶於水中使成 1000 mL。 原液 B ：確秤取9.464 g 無水磷酸氫二鈉溶於水中使成 1000 mL 。 量取原液 A 與原液B 之容量比(0.5 ：9.5)混合供作 M/15磷酸 鹽緩衝溶液，其 pH值應調整為 8.0 。 2.4. 既存脫鎂葉綠酸鹽 (Pheophoride)之定量： 精確秤取綠藻粉 100 mg(片劑者先行研成細粉後秤取置於研) 鉢中，加精製海沙約0.5 g及 85%(v/v) 丙酮20 mL迅速磨碎後 靜置，上澄液移入離心管，殘渣再以 10 mL 85%(v/v)丙酮同樣 操作二次，合併上澄液並以 3000 rpm 離心5 分鐘後，取上澄 註一 ( ) 液移入已置有 30 mL 乙醚 之分液漏斗中，加 5%硫酸鈉溶 液 50 mL ，徐徐振搖，靜置，去除硫酸鈉層，乙醚層再以每次 50 mL 之 5%硫酸鈉溶液反覆洗滌三次後以無水硫酸鈉脫水並 加乙醚稀釋至全量為 50 mL供作色素原液。 精確量取色素原液20 mL置於分液漏斗中以 20 mL ，10 mL 之 17%鹽酸溶液分次振搖萃取，合併鹽酸溶液層，移入已置 有飽和硫酸鈉溶液 150 mL即乙醚 20 mL之分液漏斗中充分振 72 年3 月22 日衛署食字第422070 號公告 搖，取以迷層再加乙醚使全量為20 mL(必要時得乙醚正確稀 釋至適測濃度)移此溶液於 1 cm測液管中，用光電比色計或分 光光度計於波長667 nm處測定其吸光度，並以70.2 為E值即( 註二 ( ) 0.1% ，1 cm時於 667 nm處之比吸光度) 計算檢體中所含脫 鎂葉綠酸鹽之mg % ，即為既存脫鎂葉綠酸鹽之含量。 2.5. 葉綠素分解酵素(Chlorophyllase)活性度之定量： 精確秤取綠藻粉 100 mg(片劑者先行研成細粉後秤取置於培) 養皿中，加 10 mL之冷 M/15磷酸鹽緩衝溶液 (pH 8.0)與丙酮 之混合液(7:3)置於 37℃培養箱中保溫3 小時後以10%鹽酸使 呈弱酸性，以下按照 2.4.節操作，並測算脫鎂葉綠酸鹽之 mg % 。 由本節測得之脫鎂葉綠酸鹽含量 即總脫鎂葉綠酸鹽含量(