上海沪教版2017等级考生物(高二)细胞工程复习(32张)汇编.ppt

动物克隆技术的实践应用 ②繁殖优良品种 ①保存濒危动物 ③医学上克隆器官 * 基因工程的工具 1、化学“剪刀”: 2、化学“浆糊” : 3、分子“运输车” : 作用： 特点： 切割DNA分子 强专一性 1、化学“剪刀”—— 限制性核酸内切酶 （简称：限制酶） CTTCATG AATTCCCTAA GAAGTACTTAA GGGATT GGCATCTTAA AATTCCGTAG CTTCATG AATTCCCTAA GAAGTACTTAA GGGATT GGCATCTTAA AATTCCGTAG 例：EcoRI: 识别序列是GAATTC，切割位点是G和A之间 参见课本P57第3段　 2、分子“运输车”—— 作用： 将外源基因送入受体细胞 运载体（常见：质粒） （拟核） 质粒 我问你答： 1、质粒是从什么生物中发现的？ 2、质粒的成分是什么？ 它是什么形状的？ 3、质粒进入其他生物细胞后，是否会被该生物消灭？ 它如何继续存在？ 细菌 DNA 环状 不会 自主复制，或整合到该生物的染色体上。 抗生素抗性基因 2、分子“运输车”—— 运载体（常见：质粒） （拟核） 质粒 如，抗青霉素基因 用于筛选含目的基因的受体细胞 1、本质： 质粒 2、形状： 3、特点： DNA 小环状 ①能“友好”地“借居” ②能自主复制 ①独立存在 4、在受体细胞内如何存在： ②插入到受体细胞的染色体中 ③含有作为标记的基因 CTTCAT CGTAA GAAGTA GCATT 质粒的一段 G AATT C C TTAA G EcoRI: G`AATTC 切开的质粒与目的基因为什么可以实现完美对接？ 重组质粒/重组DNA 质粒是怎样运载目的基因的？ 因为他们是由同一种限制酶剪开的，有相同的粘性末端（即，一段单链DNA）。 3.化学“浆糊”— 作用：连接目的基因和质粒 （磷酸与脱氧核糖之间的化学键） DNA连接酶 基因工程的工具总结： 限制性核酸内切酶（简称：限制酶） 1化学“剪刀”: 2、分子“运输车”： 3、化学“浆糊” : DNA连接酶 运载体 （常见：质粒） 作用： 切割目的基因和质粒 作用： 连接目的基因和质粒 作用： 将外源基因送入受体细胞 （磷酸与脱氧核糖之间的化学键） （磷酸与脱氧核糖之间的化学键） 目的基因 4、筛选含目的基因的 受体细胞 3、重组DNA导入受体细胞（接纳 目的基因的细胞） 三、基因工程的基本步骤： 1、获取目的基因（人们所需要的基因） 2、目的基因与运载体重组，（获得重组DNA或重组质粒） 此酶与剪切目的基因的限制酶是同一种 获取方法见P59第1段 （如，细菌） “基因表达”：DNA→RNA→蛋白质（性状） ？ 目的基因 4、筛选含目的基因的 受体细胞 3、重组DNA导入受体细胞 三、基因工程的基本步骤： 1、获取目的基因 2、目的基因与运载体重组，（获得重组DNA或重组质粒） 重组质粒 DNA连接酶 ？酶 ？ ？ ？ 质粒 导入 筛选 “基因表达”：DNA→RNA→蛋白质（性状） 筛选究竟是如何进行的？ 抗四环素基因 （标记基因） 目的基因（如，人的生长激素基因） 假如受体细胞是酵母菌，如何鉴别重组质粒是否已经进入了酵母菌？ 在培养液中加入四环素，如果。。。。。。 如果能活下来，说明质粒已进入酵母菌，目的基因也随之进入了酵母菌；反之，…… 假如目的基因是抗虫基因，受体细胞是棉花细胞，如何鉴别重组质粒是否进入了棉花细胞？ 看棉花植株是否具有抗虫性状。 筛选依据：①或② ①具有标记基因所控制的性状； ②具有目的基因所控制的性状。 如果能抗虫，说明目的基因已进入棉花细胞；反之，… 课堂练习： 1、质粒是广泛分布在细菌中的（ ） A.线状双链DNA B.线状单链DNA C.环 状双链DNA D.环状单链DNA C 2、基因工程中构建重组DNA需要的工具是（ ） A.蛋白酶 B.限制酶 C.DNA连接酶 D.限制酶和DNA连接酶 D 3、基因工程一般包括四个步骤，其正确顺序是（ ） ①目的基因与运载体重组 ②获取目的基因 ③筛