实训一微量移液器的使用.ppt

实验室安全及管理 1.实验室守则 2.实验室安全操作规程 3.主要物质的危险，有害性 4.卫生 实验一 微量移液器的使用 PPT模板下载：/moban/ 行业PPT模板：/hangye/ 节日PPT模板：/jieri/ PPT素材下载：/sucai/ PPT背景图片：/beijing/ PPT图表下载：/tubiao/ 优秀PPT下载：/xiazai/ PPT教程： /powerpoint/ Word教程： /word/ Excel教程：/excel/ 资料下载：/ziliao/ PPT课件下载：/kejian/ 范文下载：/fanwen/ 试卷下载：/shiti/ 教案下载：/jiaoan/ 实验目的 掌握微量移液器的操作技术 实验原理 操作按钮、控制螺杆和活塞纵向连成一体，活塞腔内活塞的上下移动控制移液过程。压下操作按钮时，带动控制螺杆并使活塞向下移动，排出活塞腔内的气体；松开按钮的同时，复位弹簧使活塞恢复原位，吸头内吸入一定量的液体；再次按钮，排出吸头内的液体，完成一次移液操作 仪器材料 微量移液器；吸头；酶标仪；96孔板；考马斯亮蓝；G250染色液；蛋白质标准溶液；样品溶液；稀释液 移液器 移液器 手动 电动 种类 移液器 常量 微量 种类 结构 按钮、体积调节轮、手柄、体积显示窗、控制螺杆、弹簧、活塞、密封圈、套筒（又称吸头连接圆锥）以及吸头弹射器 操作规程 正向移液 反向移液 正向移液法 1）操作按钮按至第一停点。 2）移液器吸头尖插入液体样品液面下2～3mm处，慢慢松开按钮吸入液体。待吸入液体平衡后，移出加样器。 3）移液器吸头放入容器内，尽可能使吸头尖下伸至容器最低处，并贴住容器内壁，轻轻压下操作按钮至第一停点，排出液体。约1秒钟后，继续下压操作按钮至第二停点，待吸头内液体彻底排出后，撤出加样器。 4）松开按钮，使操作按钮回复至起点。 反向移液法 1）操作按钮按至第二停点。 2）移液器吸头尖插入液体样品液面下2～3mm处，慢慢松开按钮吸入液体。待吸入液体平衡后，移出加样器。 3）移液器吸头放入容器内，尽可能使吸头尖下伸至容器的最低处，并贴住容器内壁，轻轻压下操作按钮至第一停点，排出液体，撤出加样器。（吸头内的液体可以随吸头弃去或放回原样品管内） 反复移液法 对于相同的样品、相同体积的液体，可以采用重复移液法 保养维护 应用 考马斯亮蓝蛋白质含量的测定 原理 根据蛋白质的理化性质，考马斯亮蓝G-250是比色法与色素发结合的复合方法。考马斯亮蓝G-250是一种染料，在游离状态下呈棕红色，当与蛋白质结合后呈蓝青色。在一定范围内，也就是蛋白质含量在0~1000ug范围内，蛋白质-色素结合物595nm下的吸光度与蛋白质含量成正比，所以可用比色法测定 标准孔 样品孔 1 2 3 4 5 6 7 8 9~16 稀释液（μl） 20 19 18 16 12 8 4 0 0 蛋白质标准溶液 （μl） 0 1 2 4 8 12 16 20 - 样品溶液（μl） - - - - - - - - 20 考马斯亮蓝蛋白质含量的测定 2. 各孔加入200μl G250染色液，室温反应3分钟。 3. 设定1号孔为空白孔，用酶标仪测定各反应孔OD595值并打印测定结果。