樟疫多聚半乳糖醛酸酶Pcpg 1、Pcpg 2 和Pcpg 4基因的克隆、测序及其遗传转化.pdf

农业生物技术学报 Journal of Agricultural Biotechnology 2003,11 5冤院 477~482 ·研究论文· 樟疫多聚半乳糖醛酸酶 、 和 因的克隆、测序及其遗传转化* 1 2 2 振辉 Arvid Gotesson David A. Jones (1. 西北农林科技大学园艺学院，杨凌712100 ；2. Plant Cell Biology, Research School of Biological Sciences, Australian National University, Canberra ACT2601, Australia) 摘要: 研究优化了樟疫( ）多聚半乳糖醛酸酶 和 基因克隆的PCR 条件，并 、测 对其进 了克隆 序和遗传转化。克隆获得了3 个基因，其大小均为 1 0 11 bp ；通过构建表达载体和遗传转化获得了3 个基因 的转基因菌系；3 个基因均能指导合成相应的PG 酶，其中转化 因的酵母菌（ ）所分泌的多聚 半乳糖醛酸酶（PG ）酶活性最强， 和对照 ( polygalacturonase ) 次之，而 基因所指导合成的 PG 酶无活性。Western blotting 表明，所克隆的3 个基因所指导合成的PG 酶均有不同程度的糖基化。 关键词: 疫病病原菌； 基因；克隆；测序；遗传转化；PG 活性 Cloning, Sequencing and Genetic Transformation of ( polygalacturonase) , and Genes Gong Zhenhui1 Arvid Gotesson2 David A. Jones2 (1. College of Horticulture, Northwest Sci-tech University of Agriculture and Forestry, Yangling 7 12 100, China ；2. Plant Cell Biology, Research School of Biological Sciences, Australian National University, Canberra ACT2601, Australia) ( polygalacturonase) , and genes were cloned based on the PCR composition and its reacted condition of the genes. The sequences and their expres