基因表达快速分析新技术-MPSS简介.pdf

第 卷第 期： 生 物 技 术 ， ： %’ 7 !J b2: %’ #2 7 !J 年 月 7JJ’ ! P]a)[5K#a^aGB $1/ 7JJ’ !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! ［］ ! 配对的序列杂交，这显著地增加了特异性 。它的一个主要缺 ! 应用领域 点是对杂交探针的设计，尤其是对两端互补序列的设计。如果 由于实时定量456 技术中应用了荧光染料和探针来保证 在发夹结构中荧光标记物不能紧靠淬灭子，那就会产生很强的 扩增的特异性，并且荧光信号的强弱同扩增产物的量成正比， 背景信号。同样地，如果分子信标内杂交过强，这会妨碍同目 从而实现了真正意义上的定量。 标#$ 分子的杂交，使得荧光信号不能充分释放，所以最佳的 对样品进行直观的定量分析是实时定量456 技术的一个 分子信标应该有合适的熔链特性。 主要应用方向。前面提到#$ 结合染料，分子信标，杂交探针 %’ 杂交探针 以及)*+,*- 探针，它们的敏感度相差不大，但是在特异性上有 ［］ ( 一定的差别。由于探针涉及杂交过程，要比单纯的 结合染 这种方法使用两个杂交探针，可大大提高特异性 。其中 #$ 一个探针 ’端带有荧光供体，可被激发产生绿色荧光。另一个 料有更高的特异性，同时有报道显示分子信标要比线性探针的 ’ ［］ 探针的 ’端带有荧光受体，且 ’端被封闭，以便阻止其在复性 A ( ’ 特异性还要高 。B*CD* 等对人端粒酶的6#$ 成分进行了定 ［］ 时延伸。受激发的荧光供体，发出的信号可被受体接收而发出 量分析E 。 等应用该技术对人的 、 、 F20/D )GH I % )#H I 7 )#H6% ! 红色的荧光，检测器只检测受体发出的荧光信号。在溶液中， 的