BRAF+V600E对人胰腺癌细胞株Panc1生物学行为的影响.pdfVIP

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2017-07-02 发布于上海
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BRAF+V600E对人胰腺癌细胞株Panc1生物学行为的影响.pdf

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BRAFV600E对人胰腺癌细胞株Panc1生物学行为的影响

中文摘要 BRAF 东南大学附属中大医院普外科研究生汤永辉导师高乃荣中文摘要目的通过构建BRAFV600E真核细胞表达载体并转染人胰腺癌细胞系 Panc．1，探讨BRAF 究胰腺癌的发病机制与治疗提供理论依据。 V600E的阳性细胞克隆，因)转染人胰腺癌细胞系Panc．1，通过G418筛选出BRAF 并用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)23E免疫印迹(WesternbloO的方法加以验证，同 mM谷胺酰氨以及青霉素、链霉素使其浓度的DMEM培养液中，并向其中加A．2 和72h取出细胞，每孔加10j．tL h 长570nm时的光密度(OD)值，比较三组细胞的生长情况。流式细胞计量术分析：上室，用棉签拭去残留在滤膜上室表面的残留细胞，经PBS清洗后用4％多聚甲醛固定，蒸馏水洗涤，髓染色，显微镜(200×)下计数迁移到滤膜下室表面的细胞。 Ⅱ 中文摘要 3T3成纤维细胞条件培养液；然后将上室 Transwell：j、室的下室加．A600pL含NIH 数迁移到滤膜下室表面的细胞。软琼脂克隆形成试验：每组约2，000细胞于60mm 克隆形成率。 Panc．1细胞的A570值明显增大。 (1．90士0．24)％，细胞凋亡率明显降低(尸0．01)。显增强佃0．oi)。结论通过将BRAF V600E 凋亡受抑制，而增殖能力、克隆形成能力和侵袭能力增加；提示BRAF 与胰腺癌细胞的恶性行为密切相关，但其作用机制有待进一步研究。 III 中文摘要关键词：胰腺癌；BRAF Matrigel胶 IV 英文摘要 TheEffectofBRAFV600Eon of Biological HumanPancreaticCancerCellLinePallc．1 Graduate：TANG Yong·-huiSupervisor：GAONai-·rong ofGeneral College， Departmant Surgery,Zhong-DaHospital，Medical Southeast 10009，China University,Nanjing，2 ABSTRACT theeffectofBRAFV600Eonthe behaviors Objective：Toinvestigate biological ofhuman cancercelllinePa