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SD大鼠神经干细胞分离培养、分化及鉴定

独创性声明 本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工 作及取得的研究成果。据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地 方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含 为获得大连医科大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。 与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明 确的说明并表示谢意。 学位论文作者签名:雅、 签字日期:五五L年工月L日 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者及指导教师完全了解大连医科大学有关保留、 使用学位论文的规定,同意大连医科大学保留并向国家有关部门或机 构送交学位论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅。本人授 权大连医科大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据 库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位 论文。 论文作者签名 指导教师签名 签字日期: SD大鼠神经干细胞分离培养、分化及鉴定 硕士研究生: 崔承志 指导教师: 徐英辉教授 专业名称: 神经外科学 摘 要 传统观念认为成年哺乳动物中枢神经系统不具备再生能力,这意味 着成年动物脑和脊髓内的神经细胞只能因损伤、疾病及自然凋亡等因素 逐渐减少,而不能被更新或替代。神经干细胞的发现打破了这一传统观 念,十几年来的研究发现:成年哺乳动物中枢神经系统的特定部位存在神 经干细胞,在体外通过无血清培养,在细胞营养因子的作用下能够增殖, 形成神经球并可以连续传代扩增,在血清等因子诱导下能够分化成神经 元、星形胶质细胞和少突胶质细胞。神经干细胞在体内平时处于相对静 止状态,在脑损伤等刺激因素作用下能够增殖、迁移、并分化为神经元 或神经胶质细胞,起到相应的生物学效应。缺血性脑损伤严重影响人类 健康,造成沉重的社会负担,是I临床医生以及基础研究工作者面临的严 峻课题,神经干细胞移植治疗缺血性脑疾病前景广阔。 培养、诱导分化及鉴定。 方法:分离出生24小时内SD大鼠海马,吸管吹打机械分离制成单细 胞悬液,采用无血清培养和胎牛血清诱导分化,应用细胞免疫荧光技术鉴 定神经干细胞及其分化的子代细胞。 结果:从新生大鼠海马分离的细胞呈巢蛋白免疫阳性并能在体外传 代培养和连续形成克隆;血清诱导分化后的细胞可分别表达神经元、星形 胶质细胞及少突胶质细胞的特异性抗原。 结论:分离和培养的细胞能表达神经干细胞的特异性标志物巢蛋白, 并且具有很强的增殖能力和多向分化潜能,说明新生大鼠海马存在神经 干细胞,并可进一步用于亚低温一神经干细胞移植治疗缺血性脑疾病的 研究。 关键词:神经干细胞 培养 鉴定 and ofNeuralStemCellsfromNeonatalSDRat Graduatestudent:Cui chengzhi Advisor:Xu yinghui or:Neuro Mad surgery Abstract TheconventionalldeaiSthattheadultmammalcentralnervous

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