TRAP在评价棉花种质资源多样性中的应用研究.pdfVIP

摘 要 棉花是世界性的重要的经济作物，在国民经济中占有重要的地位。为提高我国原棉和纺 织品在国际市场上的竞争力，急需改善我国原棉品质，尤其需要培育长、强、细兼备的优良 棉花品种，以适应国内外市场需求。因此，优异种质资源的创新和鉴定显得极为重要。遗传 多样性研究有助于充分开发基因资源的利用潜力，也是收集和保护珍稀基因资源的重要前 提。分子生物技术的发展为深入系统评价基因资源遗传多样性提供了更有利的条件。本研究 应用目标区域扩增多态性(TargetRegionAmplification 对来自国内外的65份棉花种质资源进行了遗传多样性分析。主要结果如下： 1．获得适用于棉花的TRAP--PCR反应体系和反应程序为： mmol／L mmol 反应体系(15“1反应体系)为：48ng模板DNA；0．9M92+；dNTPl．26 ／L；固定引物0．5I，unol／L,随机引物0．1p．mol／L和0．75UTaq酶。 反应程序为：94℃预变性4min；94℃变性45s，35℃退火45s，72℃延伸lmin；5个 4C 循环；94(2变性1min，52。C退火lmin，72。C延伸1min；35个循环，72C延伸7mim 保存。 2．对65份棉花材料进行TRAP标记分析的结果表明，被测材料问TRAP标记多态性较高，10个 引物共扩增出252条带，其中210条(占83．33％)具有多态性。每对引物平均可扩增出21条多态 Vemion2．1 性。在NTSYS．pc 1统计分析软件系统中，用UPMGA法进行聚类分析，遗传相似 开。 3．基于TRAP标记数据的聚类结果与材料形态特征和材料地理分布有一定的关系。总的来说， TRAP技术可以为棉花的系统演化和遗传背景的研究提供帮助。 4．对于新海16与新海20上出现的特异性条带进行回收克隆测序，4对引物共扩增出5条 和292bp。为新海16与新海20的分子鉴定、特别是海陆杂交后代的鉴定和分子辅助选择提 供了有效途径。 关键词：棉花，目标区域扩增多态性标记，遗传多样性，种质资源，聚类分析 AB STRACT Cottonall is industrialworldwide important crop and all roleinnational playsimportant orderto the economy．In ofrawcottoninour improvequality and inthe countrycompetition international market,itis to varietieswith necessarydevelop combinationof infibre goodquality and length，strength micronaire．Therefore，itis toinnovateand important detectnew