农药检测第五章.ppt

4. 我国目前果蔬的主要检测方法及标准 1） 酶抑制法（速测卡法） 2） 色谱检测法（气相色谱法和液相色谱法） 3） 色谱-质谱检测法（气相色谱-质谱法和液相色谱-串联质谱法） 4） 免疫分析法 酶抑制法是相对成熟的一种对部分农药进行残留速测技术。它适用于有机磷和氨基甲酸酯类农药，依据其特异性抑制昆虫中枢和周围神经系统中乙酞胆碱酯酶的活性，破坏神经的正常传导，使昆虫中毒致死的毒理学原理，将乙酞胆碱酯酶与样品反应，根据乙酞胆碱酯酶活性受到抑制程度，检测样品中有机磷和氨基甲酸酯类农药含量。 4.1 酶抑制法 酶抑制法操作简便、易行、成本低、前期投入少，但只能对有机磷和氨基甲酸酯类农药进行测定，且不能给出准确的定量结果，而只能作为田间生产检测和市场初级检测。 原理：乙酰胆碱酯酶+有机磷或氨基甲酸酯类农药——→酶活性被抑制 活性被抑制→样本中含有机磷或氨基甲酸酯类农药 乙酰胆碱酯酶 + 样本提取液 活性正常→样本中不含有机磷或 氨基甲酸酯类农药 水解 加酶 显色剂 未水解 显色剂 不显色 显色 无农药 有农药 本方法存在以下不足：①属定性（半定量）的检测方法，不能按标准判定合格与否；②目前选用的酶均只能用于蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药的残留量检测，不适用于蔬菜中其它类型农药残留的检测；③对某些种类的蔬菜中农药残留量的检测结果可能出现假阳性或假阴性；④酶的稳定性较差，质量不能保证；⑤酶源或酶的种类不同其灵敏度差异较大，绝大多数灵敏度不能达到国家标准对蔬菜农药残留限量标准的最低要求，势必造成误判。 4.2 液相色谱法 高效液相色谱法也是一种传统检测方法, 可以分离检测极性强、分子量大的离子型农药, 尤其适用于高沸点、热稳定性差、相对分子质量大、不易气化或受热易分解农药的检测。由于受热易分解或失去活性的物质不能直接使用或不适合用气相色谱(G C) 分析, 从而推动液相色谱技术的发展。 4.2 气相色谱法 气相色谱法是利用试样中各组分在气相和固定液液相间的分配系数不同, 当汽化后的试样被载气带入色谱柱中运行时, 组分就在其中的两相间进行反复多次分配, 经过一定的柱长后, 便彼此分离, 按顺序离开色谱柱进人检测器, 产生的离子流信号经放大后, 在记录器上描绘出各组分的色谱峰。 气相色谱法具有操作简单， 分析速度快， 分离效能高， 灵敏度高，应用范围广， 可进行多残留分析等特点，但一般不适用现场检侧, 沸点太高的物质或热稳定性差的物质都难以应用气相色谱法进行分析。 气相色谱法气路系统 4.3 气相色谱-质谱联用法（GC-MS） 气相色谱-质谱联用是将气相色谱仪和质谱仪串联起来作为一个整体的检测技术。样本中的残留农药通过气相色谱分离后,对它们进行质谱的从低质量数到高质量数的全谱扫描。根据特征离子的质荷比和质量色谱图的保留时间进行定性分析,根据峰高或峰面积进行定量,不但可将目标化合物与干扰杂质分开,而且可区分色谱柱无法分离或无法完全分离的样品。 4.3 液相色谱-质谱串联法（LC-MS） 液相色谱-质谱联用是利用内喷射式和粒子流式接口技术将液相色谱和质谱联接起来的方法。LC在分离方面非常有效,而MS允许分析物在痕量水平上进行确认和确证。LC-MS对简单样品具有几乎通用的多残留分析能力,检测灵敏度高,选择性好,定性定量可同时进行,结果可靠。主要用于分析热不稳定、分子量较大、难于用气相色谱分析的样品,是农药残留分析中很有力的一种方法。 由于高效液相色谱-质谱联用通过在常温条件下实现择品的分离,就可以得到质谱鉴定所获取的参数,因此比气相色谱-质谱联用技术的应用前景更为广泛。 4.4 免疫分析法 (Immunoassay Analysis,IA) 是利用抗原和相应抗体在 体外也能特异性结合的原 理发展的一类特异性强、 灵敏度高、分析容量大、分 析成本低、安全可靠的检测方法。是一种以抗体作为 生物化学检测器,对化合物、酶或蛋白质等物质进行定 性和定量分析,将免疫反应与现代测试手段相结合而建 立的超微量测定技术。由于抗体是专为抗原产生的,