人E-选择素E-Selectin ELISA试剂盒.pdfVIP

人E-选择素E-Selectin 使用说明书 产品编号：HES0 11 本试剂盒仅供科研使用，不得用于临床及诊断使用！ 试 剂 组 成 试 剂 组 成 试试 剂剂 组组 成成 名称 规格 数量 保存 包被平底微孔板 96 孔 1 可拆卸板 2-8℃密封冷藏 酶结合物 6 毫升 1 瓶 2-8℃冷藏 标准品 1 毫升 6 瓶 2-8℃冷藏 显色剂A 6 毫升 1 瓶 2-8℃冷藏 显色剂B 6 毫升 1 瓶 2-8℃避光冷藏 终止液 6 毫升 1 瓶 2-8℃冷藏 浓缩洗涤液 （100 倍 10 毫升 1 瓶 2-8℃冷藏 稀释） 使用说明书 1 份 自备物品 自备物品 自备物品自备物品 1.酶标仪（尽量提前预热） 2.微量加液器、吸头 3.蒸馏水或去离子水以及滤纸 操 作 步 骤 操 作 步 骤 操操 作作 步步 骤骤 1. 取出试剂盒，于室温（20-25℃）放置15-30 分钟。实验过程应在室温（20-25℃）内进行。 2. 取出酶标板，按照标准品的次序分别加入100μl 的标准品溶液于空白微孔中。 3. 空白微孔中加入100μl 的样品，空白对照加入100μl 的蒸馏水； 4. 在各孔中加入50μl 的酶标记溶液；（不含空白对照孔） 5. 37 1 将酶标板用封口胶密封后， ℃孵育反应 小时；（在孵育箱中保持稳定的温度与湿度） 6. 3-5 1 100 充分清洗酶标板 次，保持各孔有充足的水压；（浓缩洗涤液以： 的比例与蒸馏水稀释） 7. 酶标板洗涤后用吸水纸彻底拍干； 8. A B 50μl 各孔加入显色剂 、 液各 ；（不含空白对照孔） 9. 20-25 15 ℃下避光反应 分钟； 10. 各孔加入50μl 终止液，终止反应； 结 果 判 断 结 果 判 断 结结 果果 判判 断断 1. 30 450nm OD 分钟内在波长 的酶标仪上读取各孔的 值； 2. S0 B0 B NSB 百分结合率计算：设 管计数为 ，各标准管或样品管计数为 ，非特异管计数为 ，则百分结 B/ B0=(B NSB)/( B0 NSB)×100% 合率计算公式如下： － － 3. logit : logit :logit=ln(B/ B0)/(1 B/ B0) 计算各标准点或样品管的 值计算公式如下 － 4. OD 0 OD log-logit 将标准品的 均值与标准品 点的 均相除，为标准点的百分结合率，在 坐标纸上绘图。 5. Log-logit 1-9 10 1-9 双对数标准曲线：坐标纸上横轴从左至右第一个 表示