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四、蛋白质的紫外吸收性质 蛋白质分子中含有共轭双键的酪氨酸和色氨酸残基,具有紫外吸收能力,在280nm处有最大吸收峰。蛋白质的OD280与其浓度呈正比关系,因此可作蛋白质定量测定。 五、蛋白质的呈色反应 双缩脲反应(Biuret Reaction) 双缩脲在碱性溶液中与CuSO4作用产生紫红色络合物的反应称双缩脲反应。氨基酸无此反应,可用于检查蛋白质的水解程度。 茚三酮反应(Ninhydrin Reaction) 氨基酸与水合茚三酮作用时,产生蓝紫色反应。(可定性定量分析蛋白质) 五、蛋白质的呈色反应 米伦氏反应(Millon Reaction) 蛋白质溶液中加入米伦试剂(HgNO2 HgNO3 、 HNO3和HNO2的混和液),产生白色沉淀,加热则 变为红色沉淀,此为含有酪aa的蛋白质均有此反应。 Folin—酚试剂反应 酚试剂与蛋白质反应产生蓝色化合物。 其他颜色反应 乙醛酸反应会产生紫色环,用于鉴定含色氨酸的反应; 坂口反应会产生红色产物,用于鉴定含精氨酸的反应 3.紫外吸收性质 色氨酸、酪氨酸和苯丙氨酸对紫外光有吸 收作用。其最大吸收峰在280nm附近,以色氨酸吸收最强。 利用此性质可采用紫外分分光度法测定溶液中蛋白质的含量。 4.茚三酮反应 氨基酸与水合茚三酮在溶液中共热,发生 一系列反应,生成蓝紫色化合物,其最大吸收 峰在570nm。此反应可用于氨基酸的定性和定 量分析。 注: 脯氨酸、羟脯氨酸与茚三酮反应产生 黄色化合物。 第四节 蛋白质的分类 按组成分类 单纯蛋白质:仅由氨基酸组成 结合蛋白质:蛋白部分和非蛋白部分组成 按分子形状分类 球状蛋白质 纤维状蛋白质 按功能分类 活性蛋白质 非活性蛋白质 商洛职业技术学院 人有了知识,就会具备各种分析能力, 明辨是非的能力。 所以我们要勤恳读书,广泛阅读, 古人说“书中自有黄金屋。 ”通过阅读科技书籍,我们能丰富知识, 培养逻辑思维能力; 通过阅读文学作品,我们能提高文学鉴赏水平, 培养文学情趣; 通过阅读报刊,我们能增长见识,扩大自己的知识面。 有许多书籍还能培养我们的道德情操, 给我们巨大的精神力量, 鼓舞我们前进。 * (二)蛋白质的三级结构 (tertiary structure) 概念 是指整条肽链中所有原子的空间排布,它包括主链构象和侧链构象。 主要化学键 疏水键、氢键、盐键等非共价键和二硫键。 疏水键是维持三级结构稳定的最主要作用力。 超二级结构(supersecondary structure) 超二级结构是指若干相邻的二级结构中的构象单元彼此相互作用,形成有规则的,在空间上能辨认的二级结构组合体。通常有βαβ,βββ,αα,ββ 。 βαβ αα ββ 结构域(domain) 是在超二级结构基础上进一步卷曲折叠成紧密的近似球状的结构,在空间上彼此分隔,各自具有部分生物功能的结构。 由一条多肽链形成的蛋白质,其最高级结构为三级结构。只有具有三级结构的蛋白质才具有生物学活性。 结构域(domain) 小的蛋白质分子只有一个结构域,大的蛋白质分子有数个结构域 √结构域=三级结构 蛋白质的三级结构 蛋白质的三级结构 概念 蛋白质分子中各亚基之间的空间排布和相互接触关系。 体内有许多蛋白质分子是由两条或两条以上具有独立三级结构的多肽链通过非共价键聚合而成,其中每条具有独立三级结构的多肽链称为亚基。 化学键 氢键、盐键、范氏引力、疏水键等非共价键。 (三)蛋白质的四级结构 (quaternary structure) 蛋白质结构中应注意的几个问题 由一条多肽链形成的蛋白质其最高级结构为三级,具有三级结构的蛋白质才具有生物学活性。 形成蛋白质的四级结构至少要有两条多肽链。 两条或两条以上的多肽链靠共价键连接的蛋白质没有四级结构。 由一条多肽链形成的蛋白质与亚基不同。 维持蛋白质结构的作用力 一级结构:肽键、二硫键(都属于共价键) 二级结构:氢键(主链上—C=O—和N—H之 间形成) 三、四级结构:次级键(氢键、疏水键、 离子键、范德华力、配位键) 蛋白质分子中的次级键 氢键 常见于连接在一电负性很强的原子上的氢原子与另一电负性
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