第六章酶试卷.ppt

* * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * (3 ) 酶浓度（含量）的表示法： 应用单位重量酶制剂中所含酶活力单位表示，如：U（IU）/g； U（IU）/mg；或 U（IU）/ml。 (4 ) 酶的总活力----一定重量或体积的酶制剂所具有的酶的活力单位数。 如：U/1g 或U/100g。 (5 ) 比活力----指在特定条件下，每毫克酶蛋白所具有的酶的活力单位数。 比活力（U/mg酶蛋白） = 总活力 / 总酶蛋白毫克数 比活力愈高，表明酶愈纯； （二）酶活力、活力单位和测定条件 2．酶活力的测定条件 （1）温度：采用适宜的温度，要恒定； （2）pH：选用适宜种类和离子强度的缓冲溶液保证适宜的pH。 （3）底物浓度适宜--足够高的底物浓度， （4）避免混入任何微量杂质。 （5）测定酶促反应的初速度； （二）酶活力、活力单位和测定条件 （三）酶活力测定的方式和方法 1、酶活力测定的两种方式 （1）终点法： 测定完成一定量反应所需要的时间。如液化淀粉酶活力的测定。 （2）动力学法： 测定一定时间内酶催化的化学反应量。如蛋白酶活力测定。此法是常用的方式。 （三）酶活力测定的方式和方法 2、酶活力测定的主要方法 化学滴定法 分光光度法 量气法（气体测压法） pH测定法 氧和过氧化氢的极谱测定 旋光法 色谱法 荧光法 （四）酶活力的计算 例1：淀粉酶活力单位定义为：在最适条件下每小时分解1克淀粉的酶量为一个活力单位。现有1克淀粉酶，用水溶解成1000ml后取1ml测定淀粉酶活力，测得每10分钟分解0.5克淀粉，求总活力。 (1) 1小时1ml每液分解淀粉的量： 0.5×60÷10=3 （克） (2) 1ml酶液的活力单位数：3 ÷ 1=3（U） 1克酶的总活力=3 × 1000=3000（U）/克 例2：例1题中测得淀粉酶制剂的蛋白质含量为0.5mg/mg，求该酶的比活力。 1克淀粉酶的总活力为3000U； 1克淀粉酶的总蛋白质量为： 0.5mg/mg ×1000mg =500mg 比活力=3000÷500=6U/mg酶蛋白 例3： 1微克纯酶，在最适条件下催化速度为0.5 ?mol/min ，求总活力及比活力。 总活力=0.5IU/1微克 比活力=0.5 ÷0.001=500U/mg酶蛋白 第六节酶在工业上的应用及酶工程 一、酶在食品工业中的应用（自学） 二、酶在化工、轻工方面的应用（自学） 三、酶在医药工业中的应用（自学） 四、固定化酶 五、酶工程 四、固定化酶 （一）固定化酶的概念及优点 1．固定化酶的概念 将水溶性酶经过物理或化学方法处理后，使酶与惰性载体结合或将酶包埋起来成为一种不溶于水的状态但仍具有同样酶活力的酶衍生物 2．固定化酶的优点 （一）固定化酶的概念及优点 2．固定化酶的优点 仍具有酶的高度专一性、高效率及温和作用条件的催化特点； 稳定性提高； 固定化酶极易与底物、产物分开； 可反复使用，增加了酶的使用寿命； 使酶反应连续化、自动化，并有利于提高产品质量和产率。 （二）固定化酶的制备方法 1．吸附法 2．载体偶联法（共价法） 3．交联法 4．包埋法 （1）微小格子型—凝胶包埋法 （2）微胶囊型—微囊化包埋法 （三）研究固定化酶的意义 1．为理论上生命规律的探讨提供良好的模型； 2．在工业、医药、分析、分离等实际应用中有巨大潜力； 五、酶工程 （一）酶工程的定义与分类 1．酶工程—指酶制剂在工业上的大规模生产和应用。 2．根据研究和解决问题的手段不同 化学酶工程 生物酶工程 （二）化学酶工程 亦称为初级酶工程，它主要由酶学与化学工程技术相互结合而形成。 包括自然酶、化学修饰酶、固定化酶及化学人工酶的研究与应用。 （三）生物酶工程 亦可称为高级酶工程，是以酶学和DNA重组技术为主的现代分子生物学技术相结合的产物。 生物酶工程主要包括三个方面： 1、用DNA重组技术（即基因工程技术）大量地生产酶（克隆酶）； 2、对酶基因进行修饰，产生遗传修饰酶（突变酶）； 3、设计新的酶基因，合成自然界不曾有过的、性能稳定、催化效率更高的新酶； 人有了知识，就会具备各种分析能力， 明辨是非的能力。 所以我们要勤恳读书，广泛阅读， 古人说“书中自有黄金屋。 ”通过阅读科技书籍，我们能丰富知识， 培养逻辑思维能力； 通过