第2节基本原理与主要分离类型.ppt

第四章高效液相色谱分析 一、液-固吸附色谱 liquid-solid adsorption chromatograph 二、液-液分配色谱 liquid- liquid partition chromatograph 三、离子交换色谱 ion-exchange chromatograph 四、离子色谱 ion chromatograph 五、离子对色谱 ion-pair chromatograph 六、排阻色谱 size- exclusion chromatograph 七、亲和色谱(AC) Affinity chromatograph 一、 液-固吸附色谱liquid-solid adsorption chromatography 液-固吸附分离固定相 5.应用 application of LSC 二、 液-液分配色谱与化学键合相色谱 4. 流动相类别 5. 流动相选择 6. 选择流动相时应注意的几个问题 （二） 化学键合固定相bonded phases chromatogrophy：将各种不同基团通过化学反应键合到硅胶（担体）表面的游离羟基上。目前应用最广、性能最佳的固定相。 化学键合固定相的特点 例： 稠环芳烃的分析 三、 离子交换色谱ion-exchange chromatography 离子交换色谱分离固定相 四、 离子对色谱ion pair chromatography 五、 离子色谱ion chromatography 1.离子色谱法原理 2.离子色谱装置类型 suppressed apparatus of IC 离子色谱连续抑制装置图 离子色谱连续抑制原理图 3.离子色谱的应用 application of IC 六、 亲和色谱(AC) Affinity chromatograph 七、分离类型选择 choice of separation types * * 第二节主要分离类型与原理 high performance liquid chromatograph basic principle and main separating types 1.基本原理：组分在固定相吸附剂上的吸附与解吸； 2. 固定相：固体吸附剂为，如硅胶、氧化铝等，较常使用的是5～10μm的硅胶吸附剂； 3. 流动相：各种不同极性的一元或多元溶剂。 适用于分离相对分子质量中等的油溶性试样，对具有官能团的化合物和异构体有较高选择性； 缺点：非线形等温吸附常引起峰的拖尾； 种类：硅胶、氧化铝、分子筛、聚酰胺等； 结构类型：全多孔型和薄壳型； 粒度：5～10 μm； 官能团的类型、数目、分子极性、空间构型等决定吸附作用的强弱。 （1）不同极性或相同极性不同数量极性基团的样品，吸附能力不同。 （2）溶质分子中官能团的性质觉得洗脱顺序。 （3）保留值大小也与空间效应有关。为了得到最大吸附，分子必须能与吸附剂表面平行排列。 4.影响分离选择性的因素 结论：LSC对化合物的类型具有明显的选择性。它对异构体的分离选择性远大于其它色谱法。 1. 环境中有机氯农药残留量分析 固定相：薄壳型硅胶(37 ～50?m) 流动相：正己烷 流 速：1.5 mL/min 色谱柱：50cm?2.5mm(内径) 检测器：差示折光检测器 可对水果、蔬菜中的农药残留量进行分析。 （一）LLC 固定相与流动相均为液体（互不相溶）； 1.基本原理：组分在固定相和流动相上的分配； 2.固定相：早期涂渍固定液，固定液流失，较少采用； 3.流动相：对于亲水性固定液，采用疏水性流动相，即流动相的极性小于固定液的极性（正相 normal phase），反之，流动相的极性大于固定液的极性（反相 reverse phase）。正相与反相的出峰顺序相反； 按流动相组成分：单组分和多组分； 按极性分：极性、弱极性、非极性； 按使用方式分：固定组成洗脱和梯度洗脱。 常用溶剂： 己烷、四氯化碳、甲苯、乙酸乙酯、乙醇、乙腈、水。 采用二元或多元组合溶剂作为流动相可以灵活调节流动相的极性或增加选择性，以改进分离或调整出峰时间。 在选择流动相时，流动相的极性是选择的重要依据。 采用正相液-液分配分离时：首先选择中等极性溶剂，若组分的保留时间太短，降低溶剂极性，反之增加。 也可在低极性溶剂中，逐