1.2基因工程的原理和技术.ppt

1. 水母发光蛋白由236个氨基酸构成，其中Asp、Gly、Ser构成发光环，现已将这种蛋白质的基因作为生物转基因的标记，在转基因技术中，这种蛋白质的作用是 A．促使目的基因导入宿主细胞中 B．使目的基因容易被检测出来 C．促使目的基因在宿主细胞中复制 D．使目的基因容易成功表达 2．现有一长度为3000碱基对(bp)的线性DNA分子，用限制性核酸内切酶酶切后，进行凝胶电泳，使降解产物分开。用酶H单独酶切，结果如图l。用酶B单独酶切，结果如图2。用酶H和酶B同时酶切，结果如图3。下列相关叙述正确的是 3．下列关于生物工程中常用的几种酶的叙述中，错误的是 A．一种限制酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列，能用于提取目的基因 B．DNA连接酶可把目的基因与运载体黏性末端的碱基黏合，能形成重组DNA C．纤维素酶、果胶酶可分解细胞壁，能用于原生质体的制备和培养 D．胰蛋白酶能使动物组织分散成单个细胞，能用于动物细胞培养 ◆用基因工程技术可使大肠杆菌合成人的蛋白质。下列叙述不正确的是 A．常用相同的限制性内切酶处理的基因 和质粒 B．DNA连接酶和 RNA聚合酶是构建重组质粒必需的工具酶 C．可用含抗生素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了重组质粒 D．导入大肠杆菌的目的基因不一定能 成功表达 ◆下列属于获取目的基因的方法的是( ) ①利用mRNA反转录形成 ②从基因组文库中提取 ③从受体细胞中提取 ④利用PCR技术 ⑤利用DNA转录 ⑥人工合成 A．①②③⑤ B．①②⑤⑥ C．①②③④ D．①②④⑥ ◆基因工程又叫基因拼接技术。 (1)在该技术中，用人工合成方法获得目的基因的途径之一是：以目的基因转录的 为模板， 成互补的单链DNA，然后在酶的作用下合成 。 (2)基因工程中常用的受体细胞有细菌、真菌、 。 (3)假设以大肠杆菌质粒作为运载体，并以同一种限制性内切酶切割运载体与目的基因，将切割后的运载体与目的基因片段混合，并加入DNA连接酶。连接产物至少有 种环状DNA分子，它们分别 是 。 ◆继哺乳动物乳腺发生器研发成功后，膀胱生物发生器的研究也取得了一定进展。最近，科学家培养出一种转基因小鼠，其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中。请回答：（1）将人的生长激素基因导入小鼠受体细胞，常用方法是___________。 （2进行基因转移是，通常要将外源基因转入___________中，原因是_____________。 （3）通常采用_______ 技术检测外源基因是否插入了小鼠的基因组 （4）在研制膀胱生物反应器时，应使外源基因在小鼠的________细胞中特异表达。 (5）为使外源基因在后代长期保持，可将转基因小鼠细胞的___ __转入________细胞中构成重组细胞，使其发育成与供体具有相同性状的个体。该技术称为_______ 四、筛选含有目的基因的受体细胞 导入过程完成后，全部受体细胞都能摄入重组DNA分子吗？ 真正能摄入重组DNA分子的受体细胞很少 怎样筛选？ Ampr Tetr 氨苄青霉素抗性基因 四环素抗性基因 目的基因插入四环素抗性基因中 将大肠杆菌培养在含氨苄青霉素的培养基上 然后将菌落平移按到含四环素的培养基上培养 从分子水平进行筛选 DNA分子杂交 DNA探针 含有目的基因 不含目的基因 重组DNA 鉴定—— 抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等 五、目的基因的表达 目的基因的表达是基因工程完成的标志 插入哪一条染色体、插入某一染色体的位置都是随机的，这样可能破坏正常基因的结构和功能，使受体细胞不能完成某项生命活动甚至死亡。 目的基因插入动植物细胞基因组的随机性问题 糖蛋白是蛋白质肽链上有共价结合的糖链，这些糖链是在内质网上加工完成的。内质网存在于真核细胞中，大肠杆菌不存在这种细胞器，因此，由大肠杆菌中生产糖蛋白是不可能的。 基因工程中生产糖蛋白，为什么不选大肠杆菌而选酵母菌为受体细胞？ 这就可以解释基因工程中为何用大肠杆菌生产人胰岛素原、而用酵母菌生产干扰素。 B D 信使RNA 逆转录 双链DNA(目的基因) 动植物细胞 3 质粒自连的、目的基因片段自连的、 质粒与目的基因片段相连的环状DNA分子 显微注射法 受精卵（早期胚