固定化嗜热嗜碱土芽孢杆菌脂肪酶制备与其催化特性研究.pdf

现代食品科技 Modern Food Science and Technology 2015, Vol.31, No.5 固定化嗜热嗜碱土芽孢杆菌T1 脂肪酶的制备及 其催化特性研究 1 2 2 2 1 汪璞 ，王方华 ，唐庆芸 ，王永华 ，杨博 （1.华南理工大学生物科学与工程学院，广东广州 510006）（2.华南理工大学轻工与食品学院，广东广州 510640） 摘要：以葡聚糖填料作为载体，采用共价结合法对嗜热嗜碱土芽孢杆菌T1 脂肪酶进行固定化，在获得固定化酶制备的最佳方案 的基础上进一步考察固定化酶的催化特性。在单因素实验中，2-碘酰基苯甲酸终浓度1.23%、固定化温度50 ℃、固定化时间2 h 的条 件下效果最好，酶活力达到 50.25 U/mg 基质。利用该固定化酶催化橄榄油和甲醇进行醇解反应生成脂肪酸甲醇酯，60 h 后得率为 14.08%。同时，对固定化脂肪酶的热稳定性以及有机溶剂耐受性进行了研究，结果发现固定化T1 脂肪酶在60 ℃孵育7 h 后依然保持 70%以上的酶活性；且除甲醇、乙醇外，固定化T1 脂肪酶在经过正丁醇、正丙醇、异丙醇处理后酶活力能够增加到120%~140%。以 上催化特性研究的结果表明，该固定化酶具有催化甲醇生成生物柴油的潜力，具有良好的热稳定性和有机溶剂耐受性，是一种具有良 好工业应用前景的脂肪酶。。 关键词：T1脂肪酶；固定化；生物柴油；耐受性 文章篇号：1673-9078(2015)5-175-180 DOI: 10.13982/j.mfst.1673-9078.2015.5.028 Preparation and Catalytic Properties of Immobilized Thermoalkaliphilic T1 Lipase from Geobacillus sp. Strain T1 1 2 2 2 1 WANG Pu , WANG Fang-hua , TANG Qing-yun , WANG Yong-hua , YANG Bo (1.School of Bioscience and Bioengineering, South China University of Technology, Guangzhou 510006, China) (2.College of Light Industry and Food Sciences, South China University of Technology, Guangzhou 510640, China) Abstract: Using glucan as carrier, thermoalkaliphilic T1 lipase from Geobacillus sp. strain T1 was immobilized via covalent binding. The optimized conditions for enzyme preparation were established and catalytic properties of the immobilized T1 lipase were determined. In a single-factor experiment, specific activity of immobilized T1 lipase reached 50.25 U/mg matrix by using optimal conditions including 1.23% 2-iodoxy benzoate, immobilization temper