3：细菌的分布与分离接种.ppt

实验内容 一、细菌分布实验 空气中细菌的检查（操作） 皮肤、日常物品细菌的检查（操作） 二、细菌分离接种技术（操作） 平板划线接种法；斜面培养基接种法 液体培养基接种法；半固体穿刺接种法 三、细菌在培养基上生长现象（示教） 目的要求 认识细菌在外界的分布规律 掌握细菌分离培养基本技术 认识细菌在不同培养基中的生长现象 一、细菌的分布实验 （1）空气细菌检查 材料：培养基，普通琼脂平皿 （2）皮肤（其他物品）消毒前后的细菌检查 材料：培养基，无菌生理盐水，75%酒精棉球， 2.5%碘酒棉球，无菌棉棒 （3）自来水中的细菌检查 材料：培养基，无菌棉棒，酒精灯 自来水中的细菌检查 在1个平皿底部做好标记。 用酒精灯对水管口灭菌，拧开水管开关放水15S。 取一支无菌棉签蘸取自来水，将该棉签涂布于标有消毒前的无菌琼脂平皿表面，作来回划线，注意勿划破琼脂表面。 将平皿于37℃、24h培养后取出观察平皿表面有无细菌生长，描述菌落特征。 细菌分布实验实验结果 平板分离划线接种法 ①连续划线法 ②分段划线法 斜面培养基接种法（操作） 用途：常用于扩大纯种细菌及实验室保存菌种。 实验报告 记录细菌分布实验实验结果 记录细菌在培养基上的生长现象 细菌分布实验实验结果 * * 1. 空气中细菌的检查(操作,4块/室) 取三块琼脂平板，将2个打开皿盖 分别置于不同的环境15~30min后， 盖好皿盖。另外1个不启盖作为对 照。置37℃培养18~24h。 材料： 普通琼脂平板 方法： 结果： 计数菌落数，观察菌落数的差异。 2、皮肤（其他物品）消毒前后的细菌检查方法 在1个平皿底部做好标记，分为消毒前与消毒后两个区域。 取一支无菌棉签放入无菌盐水中浸泡，在管壁上挤干水后擦拭皮肤或其他物品，然后将该棉签涂布于无菌平皿消毒前区域，作来回划线，注意勿划破琼脂表面。 将皮肤区域或物品用碘酒棉球及酒精棉球涂擦消毒，另取一支无菌棉棒用消毒前所述方法取材，接种于标有消毒后的平皿区域。 平皿37℃、24h培养后取出观察表面有无细菌生长，比较消毒前后菌落数目，描述菌落特征。 结果： 计数菌落数 37℃×18~24h 消毒前 消毒后 菌落特征 细菌分布 自来水 消后 消前 手 指（其他物品） 空气分布 其他 颜色 透明度 隆起度 表面 边缘 形状 大小 菌落数目 1. 半固体培养基接种法（操作） 2. 斜面培养基接种法 3. 液体培养基接种法 细菌的接种法 （一）分离培养 1. 平板分离划线接种法（操作） （二）纯培养 培养结果 1 3 2 注意事项： 1.①②③区之间接种 要灭菌 2.用力适当，不要划破 琼脂表面 3.注意无菌操作 斜面培养基接种法 液体培养基接种法 半固体培养基接种法（操作） 方法：穿刺接种 结果：沿穿刺线生长——动力- 扩散生长——动力+ 三、细菌在培养基上生长现象（示教） 沉淀—成链生长 浑浊—均匀分散生长 菌膜—表面生长（需氧菌） 1. 固体 2. 半固体 3. 液体 菌落 菌苔 动力+ 动力- 固体培养基生长现象 液体培养基中生长现象 沉淀生长 混浊生长 表面生长 半固体培养基中生长现象 有鞭毛 动力+ 无鞭毛 动力－ 沿刺线生长 混浊生长 *