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±堡墼盟垦兰兰堕塑叁查!!堕堡!旦笙垫鲞笙!塑蔓§垫』堕型!!!坚型堕!!垒!鲤塾!!堕!!尘：垫!坠：兰 ·335· ·基础研究· 氡染毒小鼠肺及支气管组织的基因表达 郭志英 田梅 刘建香 阮健磊 朴春南 苏旭 【摘要】 目的 构建氡染毒小鼠肺及支气管组织差异表达基因的eDNA文库，并对其进行初步 鉴定和I川源性分析。方法采用SR—NIM02型氡审对小鼠进行吸入染毒后，常规饲养3个月，分别提 取和纯化染毒组(30上作水平月，WLM)与对照组(0．02WLM)小鼠的肺及支气管组织的总RNA，采用 SMART技术和抑制性差减杂交技术(SSH)，构建氡染毒后肺及支气管组织的正、反I旬差减杂交 Super 的eDNA文序；常规连接pGEM．T-easy载体，转化DH5a感受态细胞，巢式PCR鉴定；对阳性克隆测 序，并与GeneBank数据库进行BLAST同源性比对，进行初步功能分类。结果共获得克隆460个， 其中含有插入片段的克隆146个，经BLAST同源性比对后有48个正向差减eDNA片段与61个反向 差减eDNA片段与GeneBank中的序列有不同程度的同源性。结论成功构建了氡染毒小鼠肺支气 管差异表达eDNA文库，染毒后小鼠肺及支气管组织中某些基因会发生差异表达，其中部分基因可 能参与细胞凋亡和周期调控、机体免疫调节及细胞间信号传导等过程。 【关键词】小鼠；氡及其子体；染毒；抑制差减杂交；eDNA差减文库 of in andbronchusof miceGUO Experimentalstudy expressionlung radon-exposedZhi—ring，TIAN gene Mei，LIU a1．NationalInstitute Protection，China100088， Jian—xiang，et forRadiological CDC，Beijing China author：SU CorrespondingXu．Entail：$11,XU@nirp．en Toconstructand eDNA in and 【Abstract】Objective library identifydifferentiallyexpressed lung bronchusofmice toradon．Methods2week BALB／cmicewere exposed old，weishing(18·22)g，male ina was to was tothe SR—NIM02radonchamkr．Oneofmice radon，which placed group exposed equivalent accumulativedoseof30WLM．ThecontrolwasaboutO．02WLM．ToconstructasubtractedcDNA group library enrichedwith SMART andthe subtractive differentiallyexpressedgenes，theSuper technique suppression obtainedforwardandrevereeDNA were inserted hybridization(SSH)were fragmentsd