杉木单染色体扩增产物的RAPD分析.PDF

第 27 卷第 3 期 南京林业大学学报(自然科学版 Vol. 27 , No . 3 2003 年 5 月 Journa1 of N anjing Forestry U niversity( N atura1 Sciences Edition) May . , 2003 杉木单染色体扩增产物的 RAPD 分析 李湘阳周坚l\ 袁汉升2 张再良2 ( 1 南京林业大学，江苏 南京 210037; 2 湖南永州市林业局，湖南 永外I 425000) 摘要:在显微操作器上微分离杉木( Cunninghαmia lαnceolαtα( Lamb.) Hook) 的 4 条单染色 体，以简并寡核廿酸为引物进行 PCR 扩增(DOP- PCR) ，并将其 DOP-PCR 产物进行 RAPD 分 析。结果表明，不同染色体扩增产物间有明显多态性;用 RAPD- PCR 的方式可反应出不同染 色体遗传信息的差异，从这些差异中可能找到属于某单染色体的特异信息，进而在分子水平上 对染色体进行编号。 关键词:杉木;显微分离; DOP- PCR; RAPD 中图分类号 S722 文献标识码:A 文章编号: 1000- 2006(2003)03- 0055- 04 RAPD Studies on the Amplified Product of Single Microdissected Cunninghαmia lanceolata Chromosome 1 1 2 LI Xiang- yang , ZHOU Jian * , YUAN Han-sheng , ZHANG Za卡 liang2 (l. Nanjin g Forestry University , Nanjin g 210037 , China; 2. Forestry Bureau of Yongzhou H unan Province , Yongzhou 425000 , China) Abstract: Four sing1e chromosome of Cunninghαmia l αnceolαtαwas dissected under the micromanipu1ato r. After degenerate oligonucleotide- primec卡 PCR amplification ( DOP- PCR) , DNA product were tested with RAPD. The results indicated: the po1ymorphism among different sing1e microdissected Cunninghαm~a lαnceolαtαchromosome was eviden t. T his research provides a new method to identify microdissected Cun- ninghαmia l αnceolαtαchromosome and 10cate gene to chromosome of Cunninghαm~αlαnceolαtαchrom- some. Key words: Cunninghαm~αlαnceolαtα; M icrodissection; DO P- PCR; RAPD 随机扩增多态 DNA( Random Amp1ified Po1ymorphism DNA , RAPD) 分析是建立在 PCR 反应基础 上的一种新型分子生物学技术。该技术以基因组 DNA 为模板， 一个随机的寡核昔酸序列作引物，经 PCR 扩增，扩增产物经琼脂糖凝胶电泳分离后，染色并检测扩增产物 DNA 片段多态性。这些扩增 D