用CG株毒种制备精制狂犬病疫苗的研究a.pdf

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用CG株毒种制备精制狂犬病疫苗的研究a

微卡物毕杂 志 2001年3月 第2l卷 第 l期 JOURNALOFM1CROB 【()1工 YMa 2001vd 21Nol 研究报告 · 用 CaG株毒种制备精制狂犬病疫苗的研究 于洪本,李淑兰,崔颖杰,荣爱虹,刘建华,代 长海,胡晓明 (长春 物制品研究所.占林 喜 】30062) 摘 要 通过对扯 蔓稿毒 aG蛛在奎黄地 鼠肾细胞上传代培养,捷弭一种新型扯太病毒毒林,即地 鼠甘细胞适应肆 (CaG株)… 由于谊毒种具有 生产百法 简单,或苯诋 鼻,且外源因子污 束机 率小号优 点。鸥此试 甩谊毒种 生 产精 狂 蔓病痘 苗。在相 同条件 下, 并_}研驿 鼠脑毒种和细胞毒种各 生产 3抽藕毒 原液 .经相 同此化 工艺制备 成精 制舡 病疫苗 经羽 步杜 定用细胞毒种制备 的寝 苗岳 奎性 良好 ,癌苗免瘦 救价 与脬 最脑毒种瘦 苗无 明显差异 , 关键词 aG 林 ;地 鼠肾细胞适应林毒种 ;精制扯 是病疲苗 中图分类号 R392 文献标识码 A 文章编号 l005 7021(2001)0l 0024 03 手F犬病的唯 一]页防方珐就是暴露后注射狂犬病 接种病毒后 1周收液 用千生产 2种 同毒株的 疫 。瞅缩j犬病疫 苗由F副反应多,疫苗免疫效 犬病疫苗并加以比较。 价低 已遂渐被精制 l足病疫苗所代替。按现行方法 124 细胞毒种 的病毒繁殖 曲线测定 取 已制备 ,}产的jF犬病毒原液弊醋酸锌沉淀,凝胶过滤层析 的 层原代地 鼠肾细胞 30瓶,分为 3纠 片分别加^ 等纯化方法制备成精制手F 病痉 ,安垒性好,免 10~,l0~,l0 三个不 同稀释度 的细胞适应株毒 疫效价高,但成本较 现行浓缩疫苗高几倍。为此我 种,干 2,4,6,8,10,12d取样 并进 行 小 自鼠毒力 们试用地 鼠肾细胞适应株毒种替代睬鼠脑毒种生产 滴定。 精制狂犬病疫苗,不但节省 了成本,简化 了生产 r 125 炳毒原液的Elisa测定 改 良Elisa 接法。 艺,同时也去掉 了由于使用豚 鼠酗毒种所造成 的外 参照Braenbart3【j方法,并使用抗狂犬病毒糖蛋 白单 源困 污染 克隆抗体代替多克隆抗体。 126 狂太病毒的纯化 2种 不同毒种培 养得到 J 材料与方法 的病毒原敞分别经醋酸锌沉淀、凝腔过滤 析等纯 1.1 材料 化方法制备成半成品。 狂犬柄毒 狂犬病毒 aG株,由中国药品生物制 127 2种狂天病毒袜 的电链拴 洲 将 2种 同 品检定所提供。地 鼠肾细胞适应株毒种 (CaGPl5), 犬病毒株,分别进行电镜观察。 由本室 自行研制 。 128 连续 3批 疫苗 的实驻室质量评估 疫苗 的 12 方法 安全和效力试验按照 《中国生物制品规程》进行。采 l2l 细胞毒种的种子批建立 将 CaG株毒种 用放免法检测半成品中小牛 清残余量: 传代扩增井冻存为原始种 子批,并扩增冻存为 }种 2 结 果 批及 『作种 Fl批 。 l22 细胞毒种 的检定 ①无苗试验、病毒滴定厦 2.1 CaG株毒种种子批的建立 外源因子检测 :按 《中国生物制品规程》进行。②鉴 将 aG株豚 鼠脑毒种于地 鼠肾细胞传ft适应后, 别试验:将狂犬病毒细胞适应株毒种稀释成 同稀 优选出1株病毒滴度高、稳定性好并保持

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