实验一抗原抗体反应--凝集反应.ppt

抗原抗体反应 免疫学 抗原与相应抗体的特异性结合反应称为抗原抗体反应(antigen-antibody reaction)。 抗原抗体反应原理 抗原抗体结合反应是抗原决定簇和抗体分子超变区之间的相互作用，是一种分子表面的特异的可逆的弱结合力。这些弱结合力只能在极短距离内才能发生效应。 抗原抗体结合力 抗原和抗体的结合虽然是互补性，非共价键，特异性结合，抗原与抗体这种弱的结合力涉及下列几种分子间的作用力。 抗原抗体反特点 抗原抗体反应比例性的机制，可用网格学说加以说明。因为天然抗原大多是多价的，抗体至少为两价，当抗原与抗体在等价带结合时，相互交叉连接成具有立体结构的网格状复合体，形成肉眼可见的沉淀物。当抗原或抗体过剩时，由于过剩方的结合价得不到饱和，只能形成小网格复合物。 但是，当抗原或抗体为单价，不管抗原与抗体的量比关系是否合适，均不能出现可见反应现象。 抗原抗体反应影响因素 1.抗原、抗体的自身因素的影响; 2.电解质、酸碱度、温度及时间等实验环境因素的影响。 第四节 抗原抗体类型 1.可溶性抗原与相应抗体结合所产生的沉淀反应 2.颗粒性抗原与相应抗体结合所发生的凝集反应 3.抗原抗体结合后激活补体所致的细胞溶解反应 4.细菌外毒素或病毒与相应抗体结合所致的中和反应 5.免疫标记的抗原抗体反应。 凝集反应  1.凝集反应 间接凝集试验：用人工方法将可溶性抗原(或 抗体）吸附或偶联于载体上，使之成为致敏 载体颗粒，再与相应抗体（或抗原）作用， 在适宜电解质的参与下，出现的凝集现象。 抗球蛋白试验(Coombs试验) 协同凝集试验 实验材料 1.待测血清样品 2.CRP乳胶试剂 3.反应玻片 4.50ul加样枪 实验方法 1.反应玻片上滴加稀释血清样品50ul 2.滴加CRP乳胶试剂一滴，轻轻摇动5分钟 原理 SPA能与血清中的IgG类抗体的Fc段非特异性结合，而两个Fab段暴露在葡萄球菌菌体表面，仍然保持正常的抗体活性，与特异性抗原相遇时，能出现特异的凝集现象。 原理图 IgG SPA SPA- IgG 待测抗原 SPA- IgG-待测抗原凝集颗粒 混合 加入 Presented By Harry Mills / PRESENTATIONPRO 西南民族大学 Presented By Harry Mills / PRESENTATIONPRO Presented By Harry Mills / PRESENTATIONPRO Presented By Harry Mills / PRESENTATIONPRO 西南民族大学 Presented By Harry Mills / PRESENTATIONPRO Presented By Harry Mills / PRESENTATIONPRO * 西南民族大学 西南民族大学 * 西南民族大学 西南民族大学 抗原抗体反应 l. 静电引力 2.范德华引力 3.氢键结合力 4.疏水作用力 亲水胶体转化为疏水胶体示意图 亲水胶体 疏水胶体 转化 NaCl 可见反应 比例性 可逆性 敏感性 特异性 特异性示意图 比例性示意图 抗体过量 比例合适 抗原的量 抗原过量 抗体沉淀的量 前带 等价带 后带 抗体 混有SPAg 抗体-SPAg 抗体-SPAg 分离剂 一、抗原抗体结合 二、分离抗体 可逆性示意图 抗体 类型： ★直接凝集反应 ★间接凝集反应 ★间接凝集抑制试验 ★协同凝集试验 直接凝集试验：颗粒性抗原在有电解质的参与下，直接与相应抗体结合出现的凝集现象。 载体 可溶性抗原 致敏 致敏颗粒 NS 凝集颗粒 （正向）间接凝集试验 用特异性抗原致敏载体，检测标本中的相应抗体的方法。 待测抗体 反向间接凝集试验 ＋ 用特异性抗体致敏载体，检测标本中的相应抗原的方法。 载体 已知抗体 致敏 致敏颗粒 NS 凝集颗粒 待测抗原 间接凝集抑制试验 待测抗原 已知抗体 特异结合 抗原抗体复合物 NS ＋ 致敏颗粒 用抗原致敏载体及相应抗体作为诊断试剂，用于检测标本中是否存在与致敏载体相同的抗原。 无凝集颗粒为阳性 间接凝集抑制试验 待测抗原 已知抗体 无结合 抗原抗体分散 NS ＋ 致敏颗粒 有凝集颗粒为阴性 原理 机体受某些抗原刺激后产生“不完全抗体”，其与相应抗原结合后不出现可见的凝集现象，但能封闭抗原决定簇，使其不能再与完全抗体结合。 类型 * *