家禽精液品质的鉴定及保存.ppt

家禽精液品质的鉴定及保存;内容概要;家禽精子与哺乳动物的精子的形态差异 家禽精子的形态与哺乳动物不同，头部如镰刀形，立体形状为长柱形，颈部短，局部长，外形纤细。鸡精子全长约100～107um,头部长12.5um,顶部长约2.5um,核长约10um，直径0.5um，尾部长90～100um，精子的体积约9.2um3。 ;家禽精液与家畜精液的差异 与家畜精液相比，家禽精液量小，但其精子密度高。 鸡通常一次射精量为0.3-0.5ml,火鸡为0.2-0.3ml,鸭为0.1-0.2ml,鹅为0.2-1.5ml。精子密度鸡17-35亿/ml火鸡80-90亿/ml，鸭2-60亿/ml,鹅3-25亿/ml。 家禽精液的成份? ? 家禽的精液是由精子和精清组成。精 清是精细管、附睾和输精管的分泌物，同时还混入透明液。透明液还含有提高精子活力、呼吸和葡萄糖消耗因子，其促使精子早衰，故采精时，应尽量避免透明液混入精液。 ;家禽精液品质鉴定;镜检观测 主要包括精子活力、密度及精子形态等。 活力: 取精液，用平板法在37℃条件下用200～400倍显微镜检查，评定活力的等级，一般根据在显微镜下呈直线运动的精子数（有受精能力）所占比例，分为1、0.9、0.8、0.7、0.6…级。转圈运动或原地摆动的精子，都没有受精能力。 ;精液密度指每1ml精液中所含的精子数。在显微镜下根据精子稠密程度可分为： 密——精子中间几乎没有空隙。鸡40亿/ml,火鸡80亿以上/ml； 中——有空隙。鸡20～40亿/ml。火鸡60～80亿/ml； 稀——稀疏。鸡20亿以下/ml，火鸡50亿以下/ml。; 畸形率检查：取一滴原精液在载玻片上，抹片自然阴干，干后用95%的酒精固定1～2min,水洗，再用0.5%龙胆紫（或红、蓝墨水）染色3min,水洗阴干，在400～600倍镜检。 畸形精子有以下几种：尾部盘绕、断尾、无尾、盘绕头、钩状头、小头、破裂头、钝头、膨胀头、气球头、丝状中段等。 ;;浓度：用红细胞计数法测定。取红细胞计数吸管，吸取精液0.5处，在吸入3%的NaCl或2%伊红溶液至101处为200倍稀释，摇匀至2～3分钟，去掉前面的3滴，在计数板盖玻片上下各滴1/2滴，滴入血细胞计数板静置2～3min,进行计数。 1ml精液的精子总数=5个中方格精子数/80（小方格）×10（计数室格高度）×400（计算小方格）×200（稀释倍数）×1000（1ml等于1000mm3）。 C=n/100(C为精子总数，以10亿/ml表示；n为5个中方格的精子数)。 ;生物化学检查 精子呼吸强度测定 精子呼吸强度与精子密度和活力有关，通常采用美兰褪色试验测定。精子在美兰溶液中，呼吸时氧化脱氢，美兰获得氢离子后便是蓝色还原为无色。因此，根据美兰褪色时间可测知精液中存活精子数量的多少，判定精子的活力和密度的高低。 ;精液果糖分解的测定 精液果糖分解能力与精子活力密切相关，因此可作为精子活率评定的指标。精液中精子代谢时消耗精液中的游离果糖和磷酸果糖。 精液耗氧量测定 精子呼吸时消耗氧气多少与精子活力和密度有关，但精液耗氧量不仅取决于精子细胞内氧化，而且也受精清耗氧量所致。将一定量精液放在37℃温箱中孵化一时，用瓦（勃）氏呼吸器测定其耗氧量，计算出精子的耗氧量。;精浆中其它化合物的测定 测定精浆中其它化合物如透明质酸、谷草转氨酶、酸性磷酸酶、柠檬酸、镁、锌、甘油磷酸胆碱、肉毒碱、精氨酸、精液素、类固醇激素和前列腺素等，有助于全面了解精液的品质和动物的繁殖能力。;细菌学检查;精液的稀释和保存;1.缓冲液：pH6.8～7.4对精子无害，一般用柠檬酸钠、磷酸二氢钾和磷酸氢二钠，近年来常用三羟甲基氨基甲烷（Tris）碱性缓冲液，对碱中毒和酶活力有重要作用。 2.电解质：为延长精子在体外的存活时间，在稀释液中加入适量的非电解质或弱电解质，各种糖类和氨基酸。 3.防冻物质：防止精子冷冻休克 的作用，如卵磷脂、脂蛋白及含磷脂的复合物。 4.抗冻保护物质：有抗冻危害的作用。常用甘油和二甲基亚砜（DMSO）。 5.抗生素：为防止精液采精和处理过程中的污染，常用的有青霉素、链霉素。;精液稀释液的种类;家禽精液的保存; 常温保存 常温保存的温度在18℃～20 ℃保存无需特殊控温和制冷设备，精液处理方法简单，便于推广普及。 原理：常温保存时稀释液的弱酸性环境，抑制精子的运动和降低代谢水平，从而延长精子的存活时间。稀释性的外源能源（营养液）给精子补充足够营养物质来源，稀释液中添加适当剂量的抗菌物质以抑制细菌微生物的孳生。 方法：精液经稀释后，按照输精剂量要求分装，或者在烧杯中封口后，保存在18℃～20 ℃温度下。;