第十章:亲子鉴定2介绍.ppt

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当假设父(或假设母)与孩子有相同基因时,他们之间可能有亲生关系。此时,由于缺乏完整的父母子的三联关系,常规方法的鉴定能力有限,使亲权的认定受到限制。目前分型技术已广泛应用于亲子鉴定,如果用于亲子鉴定的各位点的累积非父排除率超过0.9990以上,在符合孟德尔遗传规律的前提下,经计算其非父排除概率达到或超过0.9990,即可肯定亲子关系。 单亲的平均非父排除率(probability of exclusion of single parent,PES)的计算方法: PES(i)=1-4a2+4a3-3a4+2a22 a2=p12+p22+……+pn2 a3=p13+p23+……+Pn3 a4=p14+P24+……+pn4 PES(i)表示第i个基因座的平均非父排除率,其中的p1、p2、…、pn为各等位基因的频率。多个基因座的累积平均非父排除概率为:PEC(c)=1- π [1-PES(i)] 经过多个基因座检测后,如没有违反孟德尔遗传规律,可由平均非父排除率进一步推算被指控男子与孩子的平均亲权概率,即:RCP=1/[2-PES(c)]。 人有了知识,就会具备各种分析能力, 明辨是非的能力。 所以我们要勤恳读书,广泛阅读, 古人说“书中自有黄金屋。 ”通过阅读科技书籍,我们能丰富知识, 培养逻辑思维能力; 通过阅读文学作品,我们能提高文学鉴赏水平, 培养文学情趣; 通过阅读报刊,我们能增长见识,扩大自己的知识面。 有许多书籍还能培养我们的道德情操, 给我们巨大的精神力量, 鼓舞我们前进。 * * α * 嘌呤由另一种嘌呤或嘧啶由另一种嘧啶替代,称为转换;嘌呤由嘧啶替代或嘧啶由嘌呤替代,称为颠换。 * DNA指纹图实质上是基因组DNA的限制性片段长度多态性,其个体特异性取决于所用酶的识别序列特异性和探针的特异性。 DNA指纹(DNA fingerprint)从形态上看是以一系列不等距离、相互间隔的多条电泳谱带组成,不同个体之间的差异在图谱中主要表现为谱带位置、数目和密度强弱的差异。 * (1)变性95℃、30s; (2)退火,实际使用的退火温度比引物Tm值[Tm=4(G+C)+2(A+T)]约低5℃,退火时间选为0.5~1.0min,足以使引物与模板DNA之间完全结合。 (3)延伸温度通常在72℃~75℃之间,若目的片段在2kb以内时, 72℃条件下延伸1.0min足够。 一般而言,25~30次循环是比较合理的。 * 只要检验足够多的遗传标记,如检验非父排除率较高的13个STR基因座,加1~2个VNTR基因位点或HLA系统,积累非父排除率已超过0.9999,无亲生关系的受检者之间几乎都有3个以上遗传标记违反遗传规律,2个遗传标记违反遗传规律的是极少数,只有1个遗传标记违反遗传规律,而否定父权更为罕见。 * 只要检验足够多的遗传标记,如检验非父排除率较高的13个STR基因座,加1~2个VNTR基因位点或HLA系统,累积非父排除率已超过0.9999,无亲生关系的受检者之间几乎都有3个以上遗传标记违反遗传规律,2个遗传标记违反遗传规律的是极少数,只有1个遗传标记违反遗传规律,而否定父权更为罕见。 * * 1、DNA指纹的基本操作过程 DNA的提取——限制酶消化——电泳分离——萨森印记转移——分子杂交——指纹图显示 2、 DNA指纹的基本特征 (1)体细胞稳定性 (2)个体高度特异性 (3)按孟德尔遗传规律遗传 排除父权的标准 经标准化实验检测遗传标记,假定为父亲的男子不能提供给孩子必需的等位基因,在不存在突变的前提下,可以排除假定父亲的父权,即可以断定他不是小孩的生物学父亲。 为了避免潜在突变影响,排除父权至少应根据两个以上遗传标记。任何情况下都不能仅根据一个遗传标记排除父权。 认定父权的标准 经标准化实验检测遗传标记,假定为父亲的男子不能被排除父权。计算概率后如同时满足下列两项指标,可以认定假定父亲的父权,即可以断定他是小孩的生物学父亲。 1.实验检测遗传标记的累计非父排除率等于或大于99.95%; 2.假定父亲的累计父权指数等于或大于2000,即在前概率相同的条件下,假定父亲的相对父权机会等于或大于99.95%。 (二)聚合酶链式反应 (polymerase chain reaction,PCR) PCR技术的主要目的是从生物体的整个基因组DNA中获取足够量的特异性片段,以供进一步分析。 PCR技术实际上是模拟生物体内的在模板DNA、引物和4种脱氧核糖核苷酸存在下,依赖于DNA聚合酶的体外DNA酶促合成反应。 PCR技术的特异性取决于引物和模板DNA结合的特异性,引物是PCR反应中最重要的成分。 反应成

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