第四章植物种质资源的保存介绍.ppt

3、影响因素 ◆预处理 ◆冷冻 ◆解冻方法 ◆植物材料的性质 ◆冷冻保护剂的使用 所使用的冷冻保护剂应具有以下特性： ◆分子质量较小 ◆易于与溶剂混合 ◆快速渗入细胞 ◆无毒或毒性小 ◆易洗脱 常用的是DMSO。 冷冻保护剂的作用： ◆降低冰点，促进过冷却和“玻璃化”状态形成 ◆提高溶液黏滞性，阻止冰晶形成 ◆增加细胞膜透性，加速胞内水分向外渗出 ◆稳定细胞内大分子正常结构，阻止低温对膜的伤害 4、超低温保存后细胞或组织活力检测 ◆根本方法是再培养 ◆染色法：FDA、伊凡蓝法、TTC等 存活率公式 存活率（%）= ×100% 重新生长的细胞（组织）数 解冻的细胞（组织）数 （三）生长抑制剂保存 主要包括高渗保存法、生长抑制剂保存法、饥饿法、矿物油覆盖法、低光照培养法及低压保存法。 1、高渗保存法 利用培养基的高渗透压来抑制离体培养材料生长的种质保存方法。 高渗物质：甘露醇、蔗糖、PEG等 高渗保存配合低温效果更明显 如： 6~10℃低温下，培养基中加4%甘露醇，可保存马铃薯1 ~ 2年，存活率最高可达90%以上。 2、生长抑制剂保存法 在培养基中加入生长抑制剂以减缓培养材料的生长，达到长期保存种质材料的保存方法。 生长调节剂： ABA、青鲜素、CCC、多效唑、B9等 使试管苗生长缓慢，生长健壮、叶色浓绿、移栽成活率高。 3、饥饿法 从培养基中减去1~2种营养元素，使植株缺乏相关营养而处于最小生长量 4、矿物油覆盖法 使培养材料与空气隔绝，延缓生长 5、低光照培养 适当减弱光照强度，缩短光照时间，进而减缓试管苗生长 6、低压保存 降低培养材料周围气压，达到抑制生长的目的 分为低气压与低氧压两种，保存原理相似 人有了知识，就会具备各种分析能力， 明辨是非的能力。 所以我们要勤恳读书，广泛阅读， 古人说“书中自有黄金屋。 ”通过阅读科技书籍，我们能丰富知识， 培养逻辑思维能力； 通过阅读文学作品，我们能提高文学鉴赏水平， 培养文学情趣； 通过阅读报刊，我们能增长见识，扩大自己的知识面。 有许多书籍还能培养我们的道德情操， 给我们巨大的精神力量， 鼓舞我们前进。 * 第4章 植物种质资源的保存 一、概念及保存类型 植物种质资源保存是指利用天然或人工创造的适宜环境保存种质资源，使个体中所包含的遗传物质保持其遗传完整性和活力，并能通过繁殖将其遗传特性传递下去。 保存类型有两种，即原生境保存和非原生境保存。 1、原生境保存 将植物的遗传材料保存在它们的自然环境中。原生境保存的地方多是植物保护区，另一种方法为农田种植保存。 珍宝岛国家级自然保护区 美国、马里兰、农田 2、非原生境保存 将植物的遗传材料保存在不是它们的自然生境的地方。 非原生境保存方式有植物园、种子库、种质圃、试管苗库、超低温库等。 具体保存方法有四种：种植保存、贮藏保存、离体保存和基因文库保存。 华南植物园 超低温库 二、种质资源离体保存 离体保存方法： ◆低温保存 ◆超低温保存 ◆生长抑制剂保存 （一）低温保存 一种缓慢生长保存方法，是通过控制培养温度来限制培养物各种生长因子的作用，使培养物生长减少到最低限度。 低温保存的基本特征是保存材料的定期继代培养，不断繁殖更新； 基本措施是控制保存材料所处的温度和光照。 延缓保存材料生长速度的另一项措施是改变培养基的成分。 种质库要定期检查，保持清洁，及时清除污染材料，并注意积累资料。 （二）超