固相萃取-液相串联质谱测定人血浆中安妥沙星的药物浓度.pdfVIP

第 40 卷 分析化学 (FENXI HUAXUE) 研究简报 第 5 期 2012 年 5 月 Chinese Joumal of Analytical Chcmistry 787~790 DOI , 10. 3724/SP. J.I096. 2012.10460 固相萃取·液相串联质谱测定人血浆中安妥沙星的药物浓度 魏敏古事 赵彩芸毛龙庆康子胜李天云 吕援 (北京大学第一医院临床纯理研究所，北京 10019]) 摘 要 建立了专属性更高的固相萃取(SPE) 高效液柑三重四级杆质谱CLC-MS/MSJ 测定人由I 浆中安妥沙犀 的方法。血浆样品经弱阴离于同相萃取柱净化后，洗脱吹干，复溶后进行检测。采用 Agilent Eclipse plus C，色 谐柱.流动相为 10 mmol/L乙酸镀(pH 3.5)- 甲醇(35 65， V/VJ，流速为 0.35 mLlmin ，选择离子检测，线性范围为 7.0 ,-50HO 叫他， RO.996，检出限 0.5 阅/L ，绝对回收率77.6% ，日间相对标准偏差7.9% 。将本方法用于受 i式者给药后的血药浓度测定，结果满意D 关键词 高效液相色i普-兰重四级杆质}普 z 固相萃取p 安妥沙恩 1 号| 安妥沙星CAntofloxacin) 为我国自主创新的 I 类i些话酬类抗菌药物，其口服剂型近期批准上市，结构 见图 l 插图。临床试验结果显示，该药对革兰氏阴性轩菌、革兰氏阳性球菌有较好的抗菌活性，其疗效 略优于左氧氟沙星、氧氟沙星及环丙沙星等，临床上主要用于呼吸道感染、泌尿系感染和皮肤软组织感 染[1] ，其注射剂型目前还在临床开发中。 在临床前动物药代动力学试验[~31 和早期的人体药代动力学试验中[4] ，测定生物样品中(血浆、尿液、 H日汁)安妥沙星药物浓度的方法均为高效液相色谱法(HPLC) 。该方法具有样品处理简单，重复性、准确 性较好的特点。在l临床前的动物试验中发现.安妥沙星体内代ì~t广泛，消除较快，大鼠体内半衰期为 2 h[2] , 主要代谢物为去甲基代谢物和能萄糖酸酸结合的 II 相代谢物[坷。人体内安豆沙星的消除较慢，半衰期 为 20 h[4] ，表现出明显的种属差异。人体内形成的代谢物较少，但代谢产物种类与动物体内基本一致。 安妥沙星和其L 甲基代谢物的极性差别很小，在 HPLC 分析中，其保留时间接近，难以将两者完全区分; 另外，按照法规的要求，在药代动力学试验中，需要测到给药后 3~5 个药物半衰期时的药物浓度，目[J 至 少达到给药后的 60 h 。为此，本研究采用了专属性更强、灵敏度更高的 LC-MSIMS 方法，并将本实验结 果与 HPLC 方法进行比较。 2 实验部分 2.1 仪器与试剂 20A 型高效液相色谱系统.由 DGU-20A3 脱气机、LC-20AT 二元泵、SiL-20A 进样器、CTO-20AC 柱温 箱组成〔日本岛津公司); AB 3000 串联质谱仪(美国 Applied Biosystems 公司) ; Eclipse PLus C，分析柱 (100 mmX 4.6 mmX 3.5μm ，美国 Agilent 公司) ; Gemini C 保护预柱(4.0 mmX2.0 mm，美国 Phenomenex 1R 公司) ; 12 孔固相萃取仪(美国 Supelco 公司) , Strata X-AW 33μm， Weak anion mixed-mode polymeric sorbent 60 mg/3 mL 固相萃取牲(美国 Phenomenex 公司h 多头氮吹仪(美同 Caliper 公司)、DL-4000B 大 容量高速冷冻离心机(上海安亭科学仪器厂);雷磁 PHS-3C pH 计(上海精科公司);Milii-Q 纯水仪(美国 Millipore 公司)。盐酸安妥沙星(中国药品生物制品检定所，批