固相萃取-高效液相色谱-质谱法测定污水中糖皮质激素.pdfVIP

第 40 卷 分析化学 (FENXI HUAXUE) 研究报告 第 4 期 2012 年 4 月 Chinese ]oumal of Analytical Chemistry 545-550 001 , 10. 3724/SP. J. 1096. 2012.10895 固相萃取，高效液相色谱-质谱法测定污水中糖皮质激素 谭丽超口 葛峰‘1 单正军l 王董忠u 1 (环境保护部南京环境科学研究所，南京 21∞42) 气南京农业大学资源与环境科学学院，南京 21∞95) 摘 要 建立了同时测定污水中 7 种糖皮质激素的固相萃取-超高效液相色谱串联质谱的分析方法。利用单 因素实验优化固相萃取影响因素z 洗脱液、洗脱体积、水样 pH 值及淋洗液。在此基础上，进行~(34) 正交实 验，通过直观分析和方差分析区分主次因素，确定了最佳固相萃取条件z 洗脱剂为乙酸乙酶，洗脱剂用量为 10 mL.pH=5.0. 清洗剂为 20% 甲蹲. 7 种糖皮质激素的检出限为1.56-10.59 ngIL，在 20-1∞ ngIL的 3 个添 加水平范围内的平均回收率为 72.5% -10 1.4% .相对标准偏差(RSD) /J、于 10.9% • 关键词 团相萃取z 越高效液相色谱-串联质谱法:糖皮质激素B 正交实验 言量F 1 号l F司 糖皮质激素具有良好的抗炎、抗免疫、抗毒素和抗休克作用，被广泛应用于疾病的治疗与预防。研究 表明，进入人和动物体内的糖皮质激素有相当一部分随粪、尿等排泄物排出，并最终排放进入环境I明，可 能对生物体造成危害，如人类生殖系统疾病，动物生殖功能异常、雌雄同体率以及性比例失调等[3-坷。 目前，有关常水处理厂进出水及其它样品中糖皮质激素检测方法的研究较多，主要采用固相萃取­ 气相色谱法、固相萃取-气相色谱串联质谱法、固相萃取-液相色谱法及固相萃取-液相色谱串联质谱 法I←叫。优化固相萃取影响因素时，很多学者[1.111- 12) 仅对部分因素进行了单因素实验，或忽视了主效应 及各因素之间的交互作用手或不能区分实验结果的差异是由各因素的水平变化而导致，还是由实验的随 机波动而导致.本实验采用超高效液相色谱串联质谱法UPLC- MSfMS) 进行测定，在单因素实验的基 础上，采用 L9 (34) 正交实验优化固相萃取条件，利用直观分析法及方差分析法确定影响因素的主次顺 序，运用单因素分析和正交表确定最佳固相萃取条件，并应用于南京市河水处理厂进出口水样的检测。 2 实验部分 2.1 仪器与试剂 ACQUITYTM 超高效液相包谱仪-Quattro Premier XE 质谱仪Waters 公司) .配 MassLynxV4.1 软件s MiIIi-Q 超纯水器〈美国 Mimpore 公司) J MH-3 微型旋涡混匀器(上海泸西分析有限公司);AG-285 电子 天平(Mettler 公司)，M仕2200 氮吹仪(EYELA 公司) ;12 通道固相萃取装置(美国 Waters 公司)， Waters Oasis HLB 固相萃取柱。00 mg.6 mL. Waters 公司〉。 甲酸、乙腊和甲醇(色谱纯，德国 Merck 公司〉。泼尼松(p陋.99.0%) .氧化泼尼松(PDL.98.0% )甲 基泼尼松龙(MET.99.0% )借他米松(BET.99.5% )地塞米松(DEX.97.0% )醋酸泼尼松龙(PDA.98.5%) • 醋酸氢化可的松(HDA.99.0%). 均购于 Dr.Ehrenstorfer 公司，取标准品适量，用甲醇配成质量浓度为 500 mglL的标准储备液，于 4 C冰箱中保存. 2.2 样晶的果集和处理 采集南京地区 4 个主要污水处理厂的进出口水样，保存于棕色瓶中，加入 1% 甲醒，避免做生物降 解，于 4 C冰箱避光保存. 取 1000 mL 水样，调节 pH 值，经纤维掳纸(0.45μm)过滤，收集滤液。以 6mL 甲醇.6mL 超纯水活 化固相萃取柱.水样以 3 mL/min 的恒定流