第五章生物碱.ppt

思考题：乌头（注1）的容量法测定的操作程序是：取样品精密称定，加无水乙醇溶液并放置24小时，过滤，减压回收乙醇，至残留液至小量时加2%盐酸溶液（注2），移入分液漏斗中，用乙醚萃取3次（注3），在样品液中滴加氨试液调PH9 10（注4），再用乙醚-氯仿（3:1）混合液提取３次（注5），合并萃取液，蒸干，加无水乙醇溶解．精密加入硫酸液（0.01mol/l）与甲基红指示剂３滴，用氢氧化钠液（0.02mol/l）滴定，并计算含量． 回答：注１处，生乌头的主要有效成分是什么？ 注2处，加盐酸溶液的目的是什么？ 注3处，用乙醚萃取的目的是什么？ 注4处，滴加氨试液的目的是什么？滴于什么样品液中？ 注5处，用此混合液能提取出待测成分吗？为什么？ 人有了知识，就会具备各种分析能力， 明辨是非的能力。 所以我们要勤恳读书，广泛阅读， 古人说“书中自有黄金屋。 ”通过阅读科技书籍，我们能丰富知识， 培养逻辑思维能力； 通过阅读文学作品，我们能提高文学鉴赏水平， 培养文学情趣； 通过阅读报刊，我们能增长见识，扩大自己的知识面。 有许多书籍还能培养我们的道德情操， 给我们巨大的精神力量， 鼓舞我们前进。 * 第五章 中药制剂中各类化学成分分析 第一节 含生物碱（alkaloid）类成分的分析 生物碱的分布 含生物碱量多的科有罂粟科、防已科、茄科、小檗科、毛茛科、芸香科、夹竹桃科、马钱科及茜草科等，中药有三尖杉、麻黄、黄连、黄柏、乌头、延胡索、粉防已、颠茄、洋金花、贝母、百部等。 二、生物碱的理化性质 溶解度 多数极性较小，属于亲脂性碱，游离状态下几乎不溶于水。成盐后则水溶性增加，易溶于水及醇中，不溶或难溶于苯、氯仿、乙醚等。生物碱和其盐这一相反的溶解性质可以用于它的提取、分离和精制。 酸碱性 生物碱结构中含氮，多呈碱性。能与无机酸、有机酸成盐 N： + H+X- [ N：H]+X- 碱性强弱为：季胺 叔胺 仲胺 伯胺 酰胺 沉淀反应 三、含生物碱类成分中药制剂的定性鉴别 常用的提取溶剂系统 非极性溶剂系统：一般先用10%的氢氧化铵、碳酸氢钠或氢氧化钠碱化，使生物盐游离，后用氯仿或乙醚提取，缺点是不能提出水溶性生物碱。 极性溶剂系统：极性较大的生物碱可用中性甲醇、乙醇、酸水（常用0.1%--1%的盐酸、硫酸等）以及缓冲液提取，但提出的杂质较多，需净化。 混合溶剂系统：用不同极性的溶剂按不同比例混合，可较好地进行提取。 （一）一般理化鉴别 （二）色谱鉴别 1、薄层色谱法吸附剂的选择：硅胶本身有弱酸性，与生物碱成盐，使吸附力增强，若用中性展开系统，其Rf值小，易拖尾。一般用碱性展开系统或在中性中加少量碱性溶剂，如二乙胺、氢氧化铵或用氨水饱和（展开缸中放一小杯氨水）或制备碱板（在硅胶板中加稀碱溶液）。碱性氧化铝因本身带有碱性，故用中性展开剂即可使生物碱得到很好的分离。 脂溶性生物碱----用吸附薄层法，用活度较大的吸附剂如硅胶、氧化铝。 水溶性生物碱----用硅藻土、纤维素作为支持剂，硅胶板也可以 展开剂的选择 脂溶性生物碱采取极性小的溶剂 水溶性用极性大的溶剂 但一般用混合溶剂较多，单一溶剂少 显色剂的选择 某些生物碱本身有颜色，可直接于可见光下观察。 有紫外吸收的可用紫外检测。 但大部分生物碱无色且无荧光，则需喷显色剂，最常用的显色剂有改良碘化铋钾、碘蒸气、氨蒸气 2、纸色谱法 3、高效液相色谱法 4、气相色谱法 四、含生物碱类成分中药制剂的含量测定 （一）总生物碱的含量测定 1、化学分析法 2、?分光光度法 （1）直接测定法 （2）离子对萃取比色法 酸性染料比色法 在一定pH介质中，生物碱B可与氢离子H+结合生成生物碱盐的阳离子BH+，而酸性染料在此条件下解离为阴离子In-,则阴阳离子能定量结合生成有色化合物（离子对）。 再用合适的有机溶剂将该离子对提取，测定其吸收度值，进而对生物碱定量。 注意事项：1、选择适当的pH 则生物碱成盐，成为阳离子BH+而酸性染料成为阴离子In-，阴阳离子可结合。如pH太低，则水相酸性强，虽然生物碱成盐，但酸性染料亦以酸的形式存在；pH太高则水相碱性强，生物碱以游离状态存在，酸性染料以离子形式存在。都不能使阴阳离子定量地结合。 2、酸性染料的选择 常用的有溴酚蓝、溴甲酚绿、溴麝香草酚蓝等 3、合适的有机溶剂 要求对生物碱与酸性染料的结合物有很好的溶解度。氯仿、二氯甲烷 P117 苦味酸盐法 雷氏盐比色法 （三）色谱法 1、高效液相色谱法 离子对色谱、正相色谱、反相色谱。 （1）、流动相方面的改进 A：加入硅醇基抑制剂，可在流动相中抑制或掩蔽固定相表面的游离硅醇基的活性，