巯基乙胺修饰电极法测定植物体内超氧阴离子自由基.pdfVIP

第36 卷 分析化学 (fI:: NXI HUAXUE) 研究报告 第 11 期 2008 年门月 Chin出e Joumal or Analyti明1 Chemislry 1505 - 1509 疏基乙肢修饰电极法测定植物体内超氧阴离子自由基 王燕. 陈寨寨 {山东州地大学化学化工与材料科学学院，济南 25∞14) 摘 要 盐酸辫胶与趟氧阴离子自由某反应生成NO，- ，通过检测 NO; 的生成散，可间接测定趟氧阴离子自 由基。 基于上述原理，建rr了-种用就基乙股向组装修饰金电极测定生物体系中超级阴病子自m~量的新方 法。 实由纷果袋明，在 pH 4.8 的 HAc-NaAc 缓冲浴液中，修饰咆板对NO; 的氧化具有良好的电催化作用，差 分脉冲溶出伏安法测定其氧化峰电流与NO; 的浓度在5.0x lO- -J. Ox lO-‘ moνL 范网内~线性关系，其 线性凶归为·程为 i阳(μA) =3. 726C( μmol汀.) +0.0257 ，相关系做为0.9983;检:H 限为1.0 x 10-moVL。该法 用于玉米幼简初叶片中超氧阴扇子自由稳产生涩率的测定.结·果令人满意。 关键词 超氧阴离子自由主事，化学修饰电饭，统基乙胶.差分脉冲溶:1\伏安法 1 号|言 在生物体的氧化代谢过程中会产生大量的活性氧自由基，它们具有很强的氧化能力，可以损伤生物 膜的结构及功能，引起核酸及蛋肉质变性，从而对细胞及组织产生十分有窑的住物学效应。 只.巾超氧阴 离子自由占HO， - )是生物体中第一个生成的氧向南葱，它既能与体内的活性物质直接作用，又能经过 一系列反两转化生成H 0 、辫自由基( -0町、单线态氧( 1 0 )等其它的氧自由基，具有更大的危害性，可 2 2 2 引起各类疾病I 1 J 。同此，生物体系巾超氧阴离子自由基的检测，对于研究自由挫的生物学作用及其消除 机应具有重要意义。 同前超氧阴离了·自由基的检测方法有电子向旋共振法、 荧光法、光度法、电化学法和化学发光法 等[2·7lo 其中电子向旋共振及化学发光法需要特殊的仪器及操作条件。邻兰在三妈告法等可见吸光光度法 虽然应川广泛， 但干扰因索多，检测灵敏度较低。 荧光法虽然提高了灵敏度，但需要合成特殊的荧光试 剂而且步骤繁琐，不适于常规应用。电化学法一般可分为自尊电极直接安堵测定法[6) 和极i普氧电饭间接 测定法( 7 ) 两大类。 其中酶电极法选碎性好、 灵敏度高，但也极寿命短、造价高。本研究提出了一种化学 修饰电极间接-枪测生物体系中超氧阴离子向嗣3蜒的新方法。 基于盐酸经胶被超氧阴离子自由恭氧化为 NO; 的反!i在，用穿li占主乙胶自组装修饰金电极检测 NO; 的牛成量，ïiJ间接测定超氧阴离子向m基。 研究了疏星在乙胶修饰电极对 NO; 的电催化作用，确立了测Xì:: N町的最传实验条件及线性方程。 结果表明， 与其它测~NO; 的修饰电极( 8 ) 相比，该修饰电极选得性好、灵敏度高、电极寿命长、生物相 容性好，特别适于生物体系中起氧阴离子自由基的检测。通过美分脉冲溶出伏安法枪测 NO; 氧化峰电 流的变化，间接测定 f玉米幼前相叶片中超氧阴离子自由基的产生速惑。 本方法具有仪器简单、操作简 便、 药剂价廉等特点. 为创究超氧阴离子自由基在植物老化过程及对环境胁迫信号的感受、传导与适应 过稳中所起的言重要作用，提供了一种准确可靠的测定方法，具有一定的应用价俏。 2 实验部分 2. 1 仪器与试剂 LK98A 微机电化学分析仪(天津市兰力科化学电子高技术布限公司) ;pHS-3C 型酸度计(上海雷磁 仪器广) ; KQ-l00DE 型数据超声波消洗吉普(昆山市超生仪苦苦有限公司) ;三电极体系:自组装金盘电极 (φ=3 mm) 为工作电饭，销片为对电极，饱和甘乘电极为参比电极;恒温水浴锅;高速离心机(上海雷磁 仪帮厂)。 2∞8心4.()2 收fi!;! ;2∞8()S .28 钱受 本文系山东省向然科学联念{胁. Y2α)6R28 )资助项目 • J::: .n剧J: r，唱;ung@ ~u. edu. cn