微生物管碟法与比浊法测定抗生素含量.pdfVIP

饲料检测 微生物管碟法与比浊法测定抗生泰含量 李伟革李应超赵营李毅解飞 北京市兽药监察所 U，mL 摘要采用微生物管碟法和比浊法测定注射用硫酸链霉素含量，微生物管碟法是将1．2和o．6 的抗生素溶液加入到牛津杯中，通过溶液的渗透与摊布在固体平板中的枯草芽孢杆茵相互作用形成抑茵圈， 通过测量标准品与供试品形成的抑茵圈直径来计算供试品的含量；比浊法是在石英比色管中按拉丁方排列 顺序加入7．5和5．oU／mL的抗生素溶液及含金黄色葡萄球菌的液体培养基，通过在线测定标准品与供试品 吸光度来计算供试品的含量，测定数据表明：微生物管碟法与比浊法测定注射用硫酸链霉素含量结果无显 著差异，同时阐述2种试验方法各自的优缺点及应注意的问题。 关键词管碟法比浊法注射用硫酸链霉素含量测定 中图分类号：s816．17 文献标志码：B 微生物管碟法测定抗生素含量是一种传统的检 100微生物比浊法测定仪和钢管放置器均为北京先 测方法，也是国际上通用的方法，国外早已在药典 驱威锋技术开发公司制造；十万分之一电子天平； 中将管碟法与比浊法同时收载。我国在2010年版 隔水式恒温培养箱；D—l型自动蒸气灭菌锅等。 《中华人民共和国兽药典》中除保留微生物管碟法 1．3缓冲液、培养基及菌悬液的制备 的同时，对部分抗生素品种也采用了微生物比浊法 1．3．1缓冲液制备 测定抗生素含量，达到了管碟法与比浊法共存。文 称取适量磷酸氢二钾和磷酸二氢钾，加水制 章采用微生物管碟法与比浊法测定注射用硫酸链霉 7．8的磷酸盐缓冲液，过滤，115℃高压灭菌 成pH 素的含量，并将2种测定方法及测定数值进行比较。 30min。 l材料与方法 1．3．2培养基制备 1．1试验材料 称取抗生素检定I号培养基100 g，加水 链霉素标准品，批号130308—200713，含量4000mL溶解，煮沸，分装；称取抗生素检定Ⅲ号 729 000 U，mg，中国药品生物制品检定所购置；供试品 培养基38g，加水2 mL溶解，煮沸，分装，以 注射用硫酸链霉素(100万单位，g)生产企业提供；上均12l℃高压灭菌15min。 1．3．3菌悬液制备 金黄色葡萄球菌[CMCC(B)26003]、枯草芽孢 取金黄色葡萄球菌的第三代培养物，接种于营 杆菌[CMCC(B)63501]、抗生素检定I号培养 养琼脂斜面培养基上，36℃培养22h，用灭菌水 7．9)批号101028和抗生素检定Ⅲ 基(千粉)(pH 号培养基(千粉)(pH7．1)批号100823均从中国将菌苔洗下制成菌悬液，当天使用。 兽医药品监察所购置；营养琼脂培养基干粉(pH 取枯草芽孢杆菌的第四代培养物，接种于营养 琼脂斜面培养基上，36℃培养7d，用灭菌氯化钠 7．2)，批号1007296，北京路桥技术有限责任公司 购置；灭菌水；磷酸氢二钾和磷酸二氢钾；培养皿 注射液将菌苔洗下制成菌悬液，在65℃水