探针3-(2-氰基乙基)胞嘧啶同步荧光法测定血清中蛋白质.pdfVIP

第28卷，第2期 光谱学与光谱分析 V01．28。No．2．pp384—388 00 and 2 8年2月 SpectroscopySpectralAnalysis February，2008 探针3一(2一氰基乙基)胞嘧啶同步荧光法测定血清中蛋白质 崔凤灵，王俊丽，崔延瑞，渠桂荣，卢 雁，樊 静 河南师范大学化学与环境科学学院，河南新乡453007 摘要在模拟人体生理条件下，基于3一(2一氰基乙基)胞嘧啶(CECT)与人血清白蛋白(HSA)和牛血清白蛋 白(BSA)之间的相互作用，以CECT为分子光谱探针研究了CECT-蛋白质体系的同步荧光光谱特征。同步 荧光光谱特征及强度与△A值、反应介质、反应温度等因素有关。在此基础上，建立了以CECT为分子光谱 探针定量测定血清样品中蛋白质含量的新方法。在最佳实验条件下，CECT-HSA和CECT-BSA体系的同步 荧光强度分别在0～441．4和0～351．0 gg·mL．1的浓度范围内与蛋白质浓度呈现良好的线性关系，检测限 分别为0．023和0．035 gg·rnL一，相对标准偏差(RSD)1．2％～3．3oA，加标回收率为97．2％～100．4％。该 方法具有简单、快速、灵敏度较高、线性范围宽、精密度和回收率较好等优点。该法可直接用于血清样品中 蛋白质总量的测定，结果令人满意。 关键词人血清白蛋白(HSA)；牛血清白蛋(BSA)；3-(2一氰基乙基)胞嘧啶(CECT)；同步荧光光谱 中图分类号：0657．3文献标识码：A 文章编号：1000-0593(2008)02—0384—05 分析研究中。我们用自己合成的硫脲衍生物新试剂，不仅对 引 言 铜和钯等金属离子进行了分析测定[】¨6|，并运用荧光光谱法 测定了血清样品中的蛋白质总含量[17|。 蛋白质是构成一切生物生命的物质之一，蛋白质化学是 核苷是由戊糖和碱基缩合而成的，在生理生化过程中起 生命科学研究的前沿领域。研究蛋白质与小分子作用的形式 着调控作用，具有抗菌、抗肿瘤、抗病毒等药效。近来有许 及机理，利用小分子探针定量分析蛋白质是生物化学和其他 多抗病毒核苷类似物已应用于临床，如阿糖胞苷、拉米夫 生物学科、食品检验、诊断疾病、临床医学、药物化学等领 定、阿昔洛韦等抗病毒药物。3-(2-氰基乙基)胞嘧啶(CECT) 域研究的热点之一。血清白蛋白是动物和人体血浆中重要的 是无环核苷类似物，目前还未见其与血清白蛋白相互作用并 载体蛋白，是血浆中最重要的蛋白质，它可以作为许多内源 作为分子探针测定蛋白质的文献报道。本文在模拟人体生理 性和外源性化合物的存储和转运蛋白。血清白蛋白的定量研 条件下，利用荧光猝灭光谱研究了CECT与HSA和BSA的 究更是临床中诸如恶性肿瘤、糖尿病、肾功能衰退、肝硬化、 相互作用。另外，在相同实验条件下，随着蛋白质浓度的不 结核病、外科手术等许多疾病诊断不可缺少的内容。因此开 断增加，同步荧光强度(IsF)明显增强，据此建立了以CECT 展其分析测定方法及其临床方面的研究，有着非常重要的现 为分子光谱探针测定蛋白质的新方法。该方法具有操作简 实意义[1’2]。目前测定蛋白质含量的方法有多种，常用的经便、试剂不玷污器壁、灵敏度高、重现性好、线性范围宽和 典方法有Lowery法[引、Bradford法Ⅲ、溴酚蓝法‘51、溴甲酚 测定结果可靠等优点，可直接用于血清样品中蛋白质总量的 绿法[63等，但这些方法或灵敏度较低、或线性范围窄、或存 测定。 在较强的吸附作用。近年来又建立了一些测定蛋白质的新方