改良超高效液相色谱串联质谱法测定25-羟基维生素D2和25-羟基维生素D3.pdfVIP

拴堕匿芏!!!!生!!旦星!!鲞箜!!塑地!型!翌丛!!丝堕!Q!!!!竺!!!!!!!!!Q：盟!!!：1021 文章编号：1673—8640(2015)lO—102l田6中图分类号：R446．1文献标志码：A 改良超高效液相色谱串联质谱法测定 25一羟基维生素D2和25-羟基维生素D3 禹松林1， 方慧玲1， 张瑞苹2， 程歆琦1， 韩建华1， 苏 薇1， 程倩1， 侯立安1， 姜小梅3， 邱玲1 (1．中国医学科学院北京协和医院检验科，北京100730；2．中日友好医院检验科， 北京100029；3．美国ABSCIEx公司北京代表处，北京100015) 摘要：目的建立可同时区分3一epi25-羟基维生素D3[3一epi 锌沉淀蛋白，以稳定同位素为内标，正己烷提取，色谱采用甲醇和水以一定比例进行梯度洗脱，质谱采用正离子 to 条件下多离子反应监测模式，3一epi25(0H)D3和25(OH)D3的定量离子通道质荷比(masscharge，m／z)均为 3．epi25(OH)D3采用25(0H)D3的标准曲线和内标。评价方法的线性、精密度和准确度等，同时用本法和常规 uPLc—MS／Ms测定307例临床样本，考察方法的一致性，判别3一epi 影响。结果本法可在13IIlin内将3一epi (1．91％～3．66％)。25(0H)D2、25(OH)D3和3一epi 106．9％、108．0％～109．9％。随机测定307例临床样本，结果显示样本3一epi25(OH)D3浓度均在3．0ng／mL以下， 偏差为一O．46 用本法测定得到的维生素D不足、缺乏和充足率分别为76．9％、14．3％、8．8％，常规法的结果分别为75．6％、 15．3％、9．1％，2种方法对临床判定的一致率达舛．1％，3一epi25(0H)D3对临床常规uPLC—MS／Ms基本无影响。 结论成功建立了可同时区分3一epi 异，为评价临床常规uPLc—MS／Ms及自动化免疫分析25(0H)D的方法提供了方法学基础。 关键词：25．羟基维生素D；3一epi25一羟基维生素D3；液相色谱串联质谱法 thedeterIIIinationof D2柚d D3 methodfor Improved se咖25．hydroxy、ritaJ【IIin25．hyd嗍、唷taIIIinby talldem llItra·pe渤撇nceⅡq谢chI砌at哪phym黜删rometry彤sD矧n删vG如珑留1，勰4鹏 (1． Qio凡1，册U厶’Ⅱ凡1，．，_MⅣG弛∞榭，，QⅢ丘增1． 尺u咖i增2，C船，vG施，lqi‘，删Ⅳ肋砒m1，5U耽i‘，C船ⅣG Scie肿船，＆咖培 DepⅡn聊m旷Cfin抬ofk60mfo形，n＆ing‰幻n讹dicofcoffege舶印施f，∞in部eAc凸dem，，矿胁d如02 Sc，Ex加．占e咖昭R印resen￡n￡i钾筋∞，＆彬增100015，饥iM) Abstract： Toestablisha methodforthedete珊inationsofse兀lm D3 Objective 3-epi25·hydroxyvitamin