改进铜皂-分光光度法测定脂肪酶活力.pdfVIP

VoL 第2l卷第1期 皮 革 科 学 与 工 程 21，No．1 SCIENCEANDENGINEERING Feb．201l 2011年2月LEATHER 文章编号：1004-7964(2011)01-0022-06 改进铜皂一分光光度法测定脂肪酶活力 侯爱军1，徐冰斌。，梁 亮1，李艳红1，彭必雨1’2+ (1．四川大学轻纺与食品学院。四川成都610065；2．四川大学制革清洁技术国家工程实验室，四』II成都610065) 摘要：建立了一种改进的脂肪酶活力的检测方法。以乳化橄榄油为底物，用乙醇和盐酸终止酶反应，并使底物乳液 破乳，用异辛烷萃取生成的脂肪酸，并用醋酸铜显色．通过铜皂的吸光度来测定生成的脂肪酸的量而得到脂肪酶的 ‘活力。主要研究了异辛烷萃取乳化体系中脂肪酸的条件，测定了脂肪酸的萃取百分率和该方法检测的线性范围。 用改进的方法对两种脂肪酶的活力进行了检测，并与传统的滴定法进行了对比。结果表明，在优化的萃取条件下 脂肪酸的回收率为83．68％，该方法的线性范围为吸光度(OD值)0．154—0．291。改进的铜皂一分光光度法测定结 果的蓐复性优于滴定法。由于该方法的测定不受反应体系的缓冲性的影响，测得的酶活力一pH曲线更准确。 关键词：脂肪酶活力测定；分光光度法；乳化橄榄油；脂肪酸 57 中图分类号：TS 文献标识码：A AModified Emulsified Colorimetricof Olive AssayLipaseactivityUsing ‘ ． 0IilastheSubstrate HOU Ai-junl，XUBing．binl，HANGLian91，12yan．hon91，PENGBi．yul2’ (1．CollegeofLightIndustry，TextileFoodEngineering，SichuanUmvenity，Chengdu610065，China； 2．National Clean EngineeringLaboratoryforTechnologyofLeatherManufacture，SichuanUniversity，Chengdu610065，China) modifiedeolorimetricmethodfor Was emulsifiedolive Abstract：A assayinglipaseactivitydeveloped．Lipasehydrolyzes acidWasextractedisooetaneinsteadof theextractedacidWasdetermined oil，and benzene，then producedfatty