交叉配血的方式与选择.ppt

骆群 红细胞抗原 血型系统（Blood group systems）29 245 血型集合（ Blood group collections）6 12 血型系列（series）： 低频率系列（700 series，low-incidence antigens) 19 高频率系列 (901 serise,high-incidence antigens) 9 红细胞抗体(1) 预期抗体：若已知红细胞ABO血型，按 Landsteiner′s法则可预知的ABO血型 抗体，即抗-A和抗-B。 预期抗体也叫做规则抗体 意外抗体：抗-A或抗-B以外的抗体。在ABO亚型 中，变异的抗-A1或某种抗-B等抗体， 也称为意外抗体。 意外抗体过去也叫做不规则抗体 红细胞抗体(2) 天然抗体：没有可察觉的抗原刺激，而机体对抗原免疫应答的产物。天然抗体多为IgM抗体，能与含有相应抗原的红细胞结合，在盐水介质中出现肉眼可见的凝集反应，所以也叫盐水抗体。IgM抗体的最适反应温度为0-25℃。 免疫抗体：抗原刺激机体而产生的。免疫抗体多为IgG抗体，在盐水介质中只能致敏含有相应抗原的红细胞，但不产生凝集，需要采用抗球蛋白搭桥、酶处理细胞或聚凝胺介导等方法，才能产生凝集反应。IgG抗体的最适反应温度为37℃。 免疫血液学的传统方法 凝集实验和溶血实验 玻片法/试管法/微孔板法 抗人球实验（冲洗） 聚凝胺试验 原理：聚凝胺是一种高价阳离子季胺盐多聚物，溶解后能产生很多正电荷，可以中和红细胞表面的负电荷，使红细胞之间距离减小，能引起正常红细胞可逆性的非特异性凝聚。如果是抗体致敏的红细胞，加入中和液后，凝集不可逆；无抗体致敏的红细胞，加入中和液后，凝集解散。 程序：按试剂盒说明书操作。 抗人球试验 - 检测 IgG（阳性与假阴性） REACTION MEDIA 22% albumin decreases zeta potential by buffering allows Ab-coated cells to come closer together Low Ionic Strength Solution (LISS) decreases zeta potential serum/cells very important; increase amount of serum with caution Polyethylene glycol (PEG) removes water, concentrating Ab use monospecific AHG with anti-IgG (else, false positives) do not read aggl. microscopically (false positives) 间接抗人球蛋白试验(IAT) 经典IAT LISS-IAT:试管法 卡 PEG-IAT 酶－IAT 聚凝胺－IAT 经典IAT 程序：2滴血清、1滴2-5%的红细胞，37℃孵育45-60分钟，生理盐水洗涤3遍后倾倒上清液，控干，加2滴抗人球蛋白试剂，离心后判读结果。用抗体致敏的红细胞检测试验结果的正确性。 LISS-IAT 原理：通过降低红细胞周围的离子氛，使抗体易于接近抗原，促进抗体在更短的时间内致敏红细胞，再使用抗人球蛋白试剂，使被致敏的红细胞产生凝集 程序：2滴血清、1滴2-5%的红细胞，加2-4滴LISS液后混匀，37℃孵育15分钟，离心观察细胞的凝集情况，用生理盐水洗涤3遍后倾倒上清液，控干，加2滴抗人球蛋白试剂，离心后判读结果。 PEG-IAT 原理：PEG是一种水溶性的中性多聚体，当含有抗原与相应抗体的溶液中加入PEG时，由于空间排斥效应作用，使溶液中的抗体饱和度提高，加速溶液中的抗原-抗体复合物的形成。 程序：2滴血清、1滴2-5%的红细胞，加4滴PEG溶液后混匀，37℃孵育15分钟，生理盐水洗涤3遍后倾倒上清液，控干，加2滴抗人球蛋白试剂，离心后判读结果。 微柱凝胶技术(卡) 原理：微管内有凝胶颗粒和试剂。凝胶颗粒具有分子筛作用，离心后，不凝集的红细胞通过全程进入微管底部，而凝集的红细胞则悬浮停留在颗粒中。 程序：按厂家说明操作 抗人球蛋白试验(Coombs试验) 直接抗人球蛋白试验(DAT) 检测红细胞是否在体内被抗体或补体致敏,用