林可霉素发酵液效价化学测定法与生物测定法的比较研究.pdf

130 江西化工 2013年第4期 林可霉素发酵液效价化学测定法与 生物测定法的比较研究 何 乐 (江西国药有限责任公司，质量管理处，江西南昌‘330052) 摘要：将生物测定法与化学测定法进行比较，从而确定一种测定抗生素效价更加快 速便捷的方法。 关键词：化学测定法生物测定法发酵液效价 在菌种选育及发酵过程监控的研究中，分析方法 生物测定法与化学效价法相进行比较，看看两者之间 对于检出高产或其他优异性状的菌种至关重要，其中 存在的差别是否可接受，从而确定一种更加快速便捷 效价分析是最主要的检测指标。化学测定法和生物测 的方法。 定法是两种最常用的效价分析方法，这两种方法操作 1材料与方法 简单，不需要贵重仪器，检测成本低，在制药企业被广 1．1生物测定法¨o 泛采用。但是由于生物测定法结果出来的时间较长， 1)培养基及其制备方法 对发酵生产指导意义不是很大，基于这种原因，我们将 ①营养琼脂斜面培养基： 原料名称 称量(g) 原料名称 称量(g) 葡萄糖 1 KH2P04 1．32 牛肉浸膏 1．5 IGHP04 3．68 酵母膏 3 NaCL 3．50 蛋白胨 6 琼脂 24 水 1000ml 除葡萄糖外，混合上述成分，加热溶化后，加葡萄 50℃左右，铺成斜面。 糖溶解后，摇匀，调节pH值为6．9—7．1，分装后蒸汽， ②检定用培养基： 0．11—0．13MPa，120—122。C，灭菌30分钟，冷却至 原料名称 葡萄糖 牛肉膏 酵母膏 蛋白胨 Na2HP04琼脂 水 称量(g) 2．5 1．5 1．6 6 4 17 1000ml 除葡萄糖外，混合上述成分，加热溶化后，加葡萄 ①藤黄微球悬液制备： 糖溶解后，摇匀，调节pH值为7．8—8．0，分装后蒸汽 0．11—0．13MPa，120—122。C，灭菌30分钟，备用。培养物，接种于营养琼脂斜面上，37±I。C培养48小时， 2)灭菌缓冲液 用0．85％灭菌氯化钠溶液在超净工作台上将菌苔洗下 ①磷酸盐缓冲液(pH7．8)： 备用。 5．599，加水使成 ②标准品溶液的制备： 称取0．419KH2P04与KH2P04 1000ml，在120—122％；，0．11—0．13MPa，灭菌30分钟，精密称取盐酸林可霉素标准品20rag，溶解于pH= 备用。 7．8的磷酸缓冲溶液中，成使1000ug／ml存放于冰箱， ②0．85％生理盐水 存放期不超过15天，使用前稀释至5ug／m1。 ③供试品的制备： 称取NaCl8．59，加水使成1000ml，在120—122。C， 0．1l一0．13MPa灭菌30分钟，备用。 发酵过